Nature.com වෙත පිවිසීම ගැන ඔබට ස්තූතියි. ඔබ භාවිතා කරන බ්‍රව්සර් අනුවාදයේ සීමිත CSS සහාය ඇත. හොඳම ප්‍රතිඵල සඳහා, ඔබගේ බ්‍රව්සරයේ නවතම අනුවාදයක් භාවිතා කිරීම (හෝ Internet Explorer හි අනුකූලතා මාදිලිය අක්‍රිය කිරීම) අපි නිර්දේශ කරමු. මේ අතරතුර, අඛණ්ඩ සහාය සහතික කිරීම සඳහා, අපි මෝස්තරයක් හෝ JavaScript නොමැතිව අඩවිය පෙන්වමු.
කැඩ්මියම් (Cd) දූෂණය යුනාන් හි ඖෂධීය ශාකයක් වන Panax notoginseng වගාවේ ආරක්ෂාවට විභව තර්ජනයක් එල්ල කරයි. බාහිර Cd ආතතිය යටතේ, දෙහි යෙදීම (0, 750, 2250 සහ 3750 kg/h/m2) සහ ඔක්සලික් අම්ලය (0, 0.1 සහ 0.2 mol/L) සමඟ පත්‍ර ඉසීමෙන් සමුච්චය Cd සහ ප්‍රතිඔක්සිකාරක මත ඇතිවන බලපෑම් තේරුම් ගැනීමට ක්ෂේත්‍ර පරීක්ෂණ සිදු කරන ලදී. Panax notoginseng හි පද්ධතිමය සහ ඖෂධීය සංරචක. ප්‍රතිඵලවලින් පෙනී ගියේ Cd ආතතිය යටතේ, ඔක්සලික් අම්ලය සමඟ දෙහි සහ පත්‍ර ඉසීමෙන් Panax notoginseng හි Ca2+ අන්තර්ගතය වැඩි කළ හැකි අතර Cd2+ හි විෂ වීම අඩු කළ හැකි බවයි. දෙහි සහ ඔක්සලික් අම්ලය එකතු කිරීම ප්‍රතිඔක්සිකාරක එන්සයිමවල ක්‍රියාකාරිත්වය වැඩි කළ අතර ඔස්මොටික් නියාමකයන්ගේ පරිවෘත්තීය වෙනස් කළේය. වඩාත්ම වැදගත් දෙය නම් CAT ක්‍රියාකාරිත්වය 2.77 ගුණයකින් වැඩි වීමයි. ඔක්සලික් අම්ලයේ බලපෑම යටතේ, SOD හි ක්‍රියාකාරිත්වය 1.78 ගුණයකින් වැඩි විය. MDA අන්තර්ගතය 58.38% කින් අඩු විය. ද්‍රාව්‍ය සීනි, නිදහස් ඇමයිනෝ අම්ල, ප්‍රෝලීන් සහ ද්‍රාව්‍ය ප්‍රෝටීන් සමඟ ඉතා සැලකිය යුතු සහසම්බන්ධයක් ඇත. දෙහි සහ ඔක්සලික් අම්ලය පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන්ග් හි කැල්සියම් අයන (Ca2+) අන්තර්ගතය වැඩි කිරීමට, සීඩී අන්තර්ගතය අඩු කිරීමට, පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන්ග් හි ආතති ප්‍රතිරෝධය වැඩි දියුණු කිරීමට සහ මුළු සැපෝනින් සහ ෆ්ලේවනොයිඩ් නිෂ්පාදනය වැඩි කිරීමට හැකිය. සීඩී අන්තර්ගතය අවම වන අතර, පාලනයට වඩා 68.57% අඩු වන අතර එය සම්මත අගයට අනුරූප වේ (Cd≤0.5 mg kg-1, GB/T 19086-2008). SPN හි අනුපාතය 7.73% ක් වූ අතර එය සියලුම ප්‍රතිකාර අතර ඉහළම මට්ටමට ළඟා වූ අතර ෆ්ලේවනොයිඩ් අන්තර්ගතය 21.74% කින් සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි වී සම්මත වෛද්‍ය අගයන් සහ ප්‍රශස්ත අස්වැන්නක් ලබා ගත්තේය.
කැඩ්මියම් (Cd) වගා කරන ලද පසෙහි බහුලව දක්නට ලැබෙන දූෂකයකි, පහසුවෙන් සංක්‍රමණය වන අතර සැලකිය යුතු ජීව විද්‍යාත්මක විෂ සහිත බවක් ඇත. El-Shafei et al2 වාර්තා කළේ කැඩ්මියම් විෂ වීම භාවිතා කරන ශාකවල ගුණාත්මක භාවයට සහ ඵලදායිතාවයට බලපාන බවයි. නිරිතදිග චීනයේ වගා කරන ලද පසෙහි අධික කැඩ්මියම් මට්ටම් මෑත වසරවලදී බරපතල වී ඇත. යුනාන් පළාත චීනයේ ජෛව විවිධත්ව රාජධානිය වන අතර ඖෂධීය ශාක විශේෂ රට තුළ පළමු ස්ථානයට පත්ව ඇත. කෙසේ වෙතත්, යුනාන් පළාත ඛනිජ සම්පත් වලින් පොහොසත් වන අතර, පතල් කැණීමේ ක්‍රියාවලිය අනිවාර්යයෙන්ම පසෙහි බැර ලෝහ දූෂණයට තුඩු දෙන අතර එය දේශීය ඖෂධීය ශාක නිෂ්පාදනයට බලපායි.
Panax notoginseng (Burkill) Chen3) යනු Araliaceae පවුලේ Panax කුලයට අයත් ඉතා වටිනා බහු වාර්ෂික ශාකසාර ඖෂධීය ශාකයකි. Panax notoginseng රුධිර සංසරණය වැඩි දියුණු කරයි, රුධිර එකතැන පල්වීම ඉවත් කරයි සහ වේදනාව සමනය කරයි. ප්‍රධාන නිෂ්පාදන ප්‍රදේශය යුනාන් පළාතේ වෙන්ෂාන් ප්‍රාන්තයයි5. දේශීය Panax notoginseng ජින්සෙන්ග් වගා කරන ප්‍රදේශවල පසෙන් 75% කට වඩා කැඩ්මියම් වලින් දූෂිත වී ඇති අතර, විවිධ ප්‍රදේශවල මට්ටම් 81% සිට 100% දක්වා වෙනස් වේ6. Cd හි විෂ සහිත බලපෑම Panax notoginseng හි ඖෂධීය සංරචක නිෂ්පාදනය සැලකිය යුතු ලෙස අඩු කරයි, විශේෂයෙන් saponins සහ flavonoids. Saponins යනු ඇග්ලිකෝන් ට්‍රයිටර්පෙනොයිඩ් හෝ ස්පිරෝස්ටේන් වන ග්ලයිකෝසයිඩ් සංයෝගයකි. ඒවා බොහෝ සාම්ප්‍රදායික චීන ඖෂධවල ප්‍රධාන ක්‍රියාකාරී අමුද්‍රව්‍ය වන අතර සැපෝනින් අඩංගු වේ. සමහර සැපෝනින් වලට ප්‍රතිබැක්ටීරීය ක්‍රියාකාරකම් හෝ ප්‍රති-ප්‍රති-නාශක, අවසාදිත සහ පිළිකා නාශක බලපෑම් වැනි වටිනා ජීව විද්‍යාත්මක ක්‍රියාකාරකම් ද ඇත7. ෆ්ලේවනොයිඩ් යනු සාමාන්‍යයෙන් මධ්‍යම කාබන් පරමාණු තුනක් හරහා ෆීනෝලික් හයිඩ්‍රොක්සයිල් කාණ්ඩ දෙකක් සම්බන්ධ කර ඇති සංයෝග මාලාවකි. ප්‍රධාන හරය 2-ෆීනයිල්ක්‍රෝමැනෝන් 8 වේ. එය ශාකවල ඔක්සිජන් නිදහස් රැඩිකලුන් ඵලදායී ලෙස ඉවත් කළ හැකි ශක්තිමත් ප්‍රතිඔක්සිකාරකයකි. එය ගිනි අවුලුවන ජීව විද්‍යාත්මක එන්සයිම විනිවිද යාම වළක්වයි, තුවාල සුව කිරීම සහ වේදනා සහන ප්‍රවර්ධනය කරයි, සහ කොලෙස්ටරෝල් මට්ටම අඩු කරයි. එය පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන්ග් හි ප්‍රධාන ක්‍රියාකාරී අමුද්‍රව්‍යවලින් එකකි. පැනැක්ස් ජින්සෙන්ග් නිෂ්පාදන ප්‍රදේශවල පසෙහි කැඩ්මියම් දූෂණය පිළිබඳ ගැටළුව විසඳීමට සහ එහි අත්‍යවශ්‍ය ඖෂධීය අමුද්‍රව්‍ය නිෂ්පාදනය සහතික කිරීමට හදිසි අවශ්‍යතාවයක් පවතී.
කැඩ්මියම් දූෂණයෙන් ස්ථිතික පස පිරිසිදු කිරීම සඳහා දෙහි බහුලව භාවිතා වන නිෂ්ක්‍රීයකාරකයකි10. එය pH අගය වැඩි කිරීමෙන් සහ පාංශු කැටායන හුවමාරු ධාරිතාව (CEC), පසේ ලුණු සන්තෘප්තිය (BS) සහ පසේ රෙඩොක්ස් විභවය (Eh)3, 11 වෙනස් කිරීමෙන් පසෙහි Cd හි ජෛව උපයෝගීතාව අඩු කිරීමෙන් පසෙහි Cd අවශෝෂණය හා තැන්පත් වීමට බලපායි. ඊට අමතරව, , දෙහි විශාල Ca2+ ප්‍රමාණයක් සපයයි, Cd2+ සමඟ අයනික ප්‍රතිවිරෝධතාවක් ඇති කරයි, මුල්වල අවශෝෂණ ස්ථාන සඳහා තරඟ කරයි, පසට Cd ප්‍රවාහනය වළක්වයි, සහ අඩු ජීව විද්‍යාත්මක විෂ සහිත බවක් ඇත. Cd ආතතිය යටතේ 50 mmol L-1 Ca එකතු කළ විට, තල කොළවල Cd ප්‍රවාහනය වළක්වන ලද අතර Cd සමුච්චය 80% කින් අඩු විය. සහල් (Oryza sativa L.) සහ අනෙකුත් භෝග වල සමාන අධ්‍යයන ගණනාවක් වාර්තා වී ඇත12,13.
බැර ලෝහ සමුච්චය වීම පාලනය කිරීම සඳහා බෝග පත්‍ර මගින් ඉසීම මෑත වසරවල බැර ලෝහ පාලනය කිරීම සඳහා නව ක්‍රමයකි. එහි මූලධර්මය ප්‍රධාන වශයෙන් ශාක සෛලවල චෙලේෂන් ප්‍රතික්‍රියාවට සම්බන්ධ වන අතර එමඟින් සෛල බිත්තියේ බැර ලෝහ තැන්පත් වන අතර ශාක මගින් බැර ලෝහ අවශෝෂණය වීම වළක්වයි14,15. ස්ථායී ඩයසිඩ් චෙලේටින් කාරකයක් ලෙස, ඔක්සලික් අම්ලයට ශාකවල බැර ලෝහ අයන සෘජුවම චෙලේට් කළ හැකි අතර එමඟින් විෂ වීම අඩු වේ. සෝයා බෝංචි වල ඔක්සලික් අම්ලයට Cd2+ චෙලේට් කළ හැකි අතර ඉහළ ට්‍රයිකෝම් සෛල හරහා Cd අඩංගු ස්ඵටික මුදා හැරිය හැකි බවත්, ශරීරයේ Cd2+ මට්ටම් අඩු කළ හැකි බවත් පර්යේෂණවලින් පෙන්වා දී ඇත16. ඔක්සලික් අම්ලයට පසෙහි pH අගය නියාමනය කළ හැකි අතර, සුපර් ඔක්සයිඩ් ඩිස්මියුටේස් (SOD), පෙරොක්සිඩේස් (POD) සහ කැටලේස් (CAT) ක්‍රියාකාරිත්වය වැඩි දියුණු කළ හැකි අතර, ද්‍රාව්‍ය සීනි, ද්‍රාව්‍ය ප්‍රෝටීන්, නිදහස් ඇමයිනෝ අම්ල සහ ප්‍රෝලීන් විනිවිද යාම නියාමනය කළ හැකිය. පරිවෘත්තීය නියාමකයින්17,18. ශාකයේ අම්ලය සහ අතිරික්ත Ca2+ න්‍යෂ්ටික ප්‍රෝටීන වල ක්‍රියාකාරිත්වය යටතේ කැල්සියම් ඔක්සලේට් අවක්ෂේපයක් සාදයි. ශාකවල Ca2+ සාන්ද්‍රණය නියාමනය කිරීමෙන් ශාකවල ද්‍රාවිත ඔක්සලික් අම්ලය සහ Ca2+ නියාමනය ඵලදායී ලෙස සාක්ෂාත් කරගත හැකි අතර ඔක්සලික් අම්ලය සහ Ca2+19,20 අධික ලෙස සමුච්චය වීම වළක්වා ගත හැකිය.
යොදන ලද දෙහි ප්‍රමාණය අලුත්වැඩියා කිරීමේ බලපෑමට බලපාන ප්‍රධාන සාධකවලින් එකකි. දෙහි මාත්‍රාව 750 සිට 6000 kg/m2 දක්වා පරාසයක පවතින බව සොයා ගන්නා ලදී. pH අගය 5.0~5.5 ක් සහිත ආම්ලික පස සඳහා, 3000~6000 kg/h/m2 මාත්‍රාවකට දෙහි යෙදීමේ බලපෑම 750 kg/h/m221 මාත්‍රාවකට වඩා සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි ය. කෙසේ වෙතත්, දෙහි අධික ලෙස යෙදීමෙන් පසෙහි pH අගයෙහි සැලකිය යුතු වෙනස්කම් සහ පස සංයුක්ත කිරීම වැනි පසෙහි සමහර ඍණාත්මක බලපෑම් ඇති වේ. එබැවින්, අපි CaO ප්‍රතිකාර මට්ටම් 0, 750, 2250 සහ 3750 kg hm-2 ලෙස අර්ථ දැක්වුවෙමු. Arabidopsis thaliana සඳහා ඔක්සලික් අම්ලය යොදන විට, 10 mmol L-1 සාන්ද්‍රණයකදී Ca2+ සැලකිය යුතු ලෙස අඩු වී ඇති බව සොයා ගන්නා ලද අතර, Ca2+ සංඥාකරණයට බලපාන CRT ජාන පවුල දැඩි ලෙස ප්‍රතිචාර දැක්වීය. පෙර අධ්‍යයනයන් කිහිපයක සමුච්චය වීම නිසා මෙම පරීක්ෂණයේ සාන්ද්‍රණය තීරණය කිරීමට සහ Ca2+ සහ Cd2+23,24,25 මත බාහිර අතිරේකවල අන්තර්ක්‍රියාකාරිත්වයේ බලපෑම තවදුරටත් අධ්‍යයනය කිරීමට අපට හැකි විය. එබැවින්, මෙම අධ්‍යයනයේ අරමුණ වන්නේ Cd-දූෂිත පසෙහි Panax notoginseng හි Cd අන්තර්ගතය සහ ආතතියට ඔරොත්තු දීමේ හැකියාව මත බාහිර දෙහි සහ ඔක්සලික් අම්ල කොළ ඉසිනයේ නියාමන යාන්ත්‍රණය ගවේෂණය කිරීම සහ ඖෂධීය ගුණාත්මකභාවය සහ කාර්යක්ෂමතාව වඩා හොඳින් සහතික කිරීමේ ක්‍රම තවදුරටත් ගවේෂණය කිරීමයි. Panax notoginseng නිෂ්පාදනය. කැඩ්මියම්-දූෂිත පසෙහි ශාකසාර ශාක වගාවේ පරිමාණය වැඩි කිරීම සහ ඖෂධ වෙළඳපොළට අවශ්‍ය උසස් තත්ත්වයේ, තිරසාර නිෂ්පාදනයක් ලබා ගැනීම සඳහා ඔහු වටිනා මග පෙන්වීමක් ලබා දෙයි.
දේශීය ජින්සෙන්ග් ප්‍රභේදයක් වන වෙන්ෂාන් පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන්ග් ද්‍රව්‍ය ලෙස භාවිතා කරමින්, යුනාන් පළාතේ වෙන්ෂාන් ප්‍රාන්තයේ කියුබෙයි ප්‍රාන්තයේ ලැනිෂායි හි ක්ෂේත්‍ර අත්හදා බැලීමක් සිදු කරන ලදී (24°11′N, 104°3′E, උන්නතාංශය මීටර් 1446). සාමාන්‍ය වාර්ෂික උෂ්ණත්වය 17°C වන අතර සාමාන්‍ය වාර්ෂික වර්ෂාපතනය මි.මී. 1250 කි. අධ්‍යයනය කරන ලද පසෙහි පසුබිම් අගයන් වූයේ TN 0.57 g kg-1, TP 1.64 g kg-1, TC 16.31 g kg-1, OM 31.86 g kg-1, ක්ෂාර ජල විච්ඡේදනය කළ N 88.82 mg kg-1, පොස්පරස් රහිත ය. 18.55 mg kg-1, නිදහස් පොටෑසියම් 100.37 mg kg-1, මුළු කැඩ්මියම් 0.3 mg kg-1, pH 5.4.
2017 දෙසැම්බර් 10 වන දින, 6 mg/kg Cd2+ (CdCl2·2.5H2O) සහ දෙහි ප්‍රතිකාර (0, 750, 2250 සහ 3750 kg/h/m2) මිශ්‍ර කර එක් එක් බිම් කැබැල්ලක 0~10 සෙ.මී. ස්ථරයක පස මතුපිටට යොදන ලදී. සෑම ප්‍රතිකාරයක්ම 3 වතාවක් පුනරාවර්තනය කරන ලදී. පරීක්ෂණ බිම් අහඹු ලෙස පිහිටා ඇති අතර, එක් එක් බිම් කැබැල්ල 3 m2 ක ප්‍රදේශයක් ආවරණය කරයි. වසරක් වයසැති පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන් බීජ පැල දින 15 ක වගා කිරීමෙන් පසු බද්ධ කරන ලදී. හිරු ආවරණ දැලක් භාවිතා කරන විට, හිරු ආවරණ දැල තුළ පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන්හි ආලෝක තීව්‍රතාවය සාමාන්‍ය ස්වාභාවික ආලෝක තීව්‍රතාවයෙන් 18% ක් පමණ වේ. දේශීය සාම්ප්‍රදායික වගා ක්‍රම අනුව වගාව සිදු කෙරේ. 2019 දී පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන් ඉදීමේ අවධියට පෙර, සෝඩියම් ඔක්සලේට් ආකාරයෙන් ඔක්සලික් අම්ලය ඉසින්න. ඔක්සලික් අම්ල සාන්ද්‍රණය පිළිවෙලින් 0, 0.1 සහ 0.2 mol L-1 වූ අතර, කසළ ලීච් ද්‍රාවණයේ සාමාන්‍ය pH අගය අනුකරණය කිරීම සඳහා pH අගය 5.16 දක්වා සකස් කිරීමට NaOH භාවිතා කරන ලදී. කොළවල ඉහළ සහ පහළ මතුපිට සතියකට වරක් පෙ.ව. 8:00 ට ඉසින්න. 5 වන සතිය තුළ 4 වතාවක් ඉසීමෙන් පසු, අවුරුදු 3 ක් වයසැති පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන් ශාක අස්වනු නෙලනු ලැබීය.
2019 නොවැම්බර් මාසයේදී, අවුරුදු තුනක් වයසැති පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන් ශාක ක්ෂේත්‍රයෙන් එකතු කර ඔක්සලික් අම්ලය ඉසින ලදී. භෞතික විද්‍යාත්මක පරිවෘත්තීය හා එන්සයිම ක්‍රියාකාරිත්වය සඳහා මැනිය යුතු අවුරුදු තුනක් වයසැති පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන් ශාකවල සමහර සාම්පල කැටි කිරීම සඳහා නලවල තබා, ඉක්මනින් ද්‍රව නයිට්‍රජන් සමඟ ශීත කර, පසුව -80°C දී ශීතකරණයක් වෙත මාරු කරන ලදී. පරිණත අවධියේදී Cd සහ ක්‍රියාකාරී අමුද්‍රව්‍ය අන්තර්ගතය සඳහා මැනිය යුතු සමහර මූල සාම්පල නළ ජලයෙන් සෝදා, 105°C දී විනාඩි 30 ක්, නියත බර 75°C දී වියළා, ගබඩා කිරීම සඳහා මෝටාර් එකක අඹරන ලදී.
වියළි ශාක සාම්පලයක් ග්‍රෑම් 0.2 ක් කිරා, එය Erlenmeyer ෆ්ලාස්කුවක තබා, HNO3 මිලි ලීටර් 8 ක් සහ HClO4 මිලි ලීටර් 2 ක් එකතු කර එක රැයකින් වසා දමන්න. ඊළඟ දවසේ, සුදු දුමාරයක් දිස්වන තුරු සහ ආහාර ජීර්ණ යුෂ පැහැදිලි වන තුරු විද්‍යුත් තාප ජීර්ණය සඳහා Erlenmeyer ෆ්ලාස්කුවක තබා ඇති වක්‍ර පුනීලයක් භාවිතා කරන්න. කාමර උෂ්ණත්වයට සිසිල් වූ පසු, මිශ්‍රණය මිලි ලීටර් 10 ක පරිමාමිතික ෆ්ලාස්කුවකට මාරු කරන ලදී. පරමාණුක අවශෝෂණ වර්ණාවලීක්ෂයක් (Thermo ICE™ 3300 AAS, USA) භාවිතයෙන් Cd අන්තර්ගතය තීරණය කරන ලදී. (GB/T 23739-2009).
වියළි ශාක සාම්පලයක් ග්‍රෑම් 0.2 ක් කිරා මැන, මිලි ලීටර් 50 ප්ලාස්ටික් බෝතලයක තබා, මිලි ලීටර් 10 කට L-1 HCL 1 mol එකතු කර, පියන වසා පැය 15 ක් හොඳින් සොලවා පෙරන්න. පයිප්පයක් භාවිතා කර, අවශ්‍ය පෙරහන ප්‍රමාණය පයිප්ප කර, ඒ අනුව තනුක කර, SrCl2 ද්‍රාවණය එකතු කර Sr2+ සාන්ද්‍රණය 1g L-1 දක්වා ගෙන එන්න. පරමාණුක අවශෝෂණ වර්ණාවලීක්ෂයක් (තාප ICE™ 3300 AAS, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය) භාවිතයෙන් Ca අන්තර්ගතය මනිනු ලැබීය.
මැලොන්ඩියල්ඩිහයිඩ් (MDA), සුපර්ඔක්සයිඩ් ඩිස්මියුටේස් (SOD), පෙරොක්සිඩේස් (POD) සහ කැටලේස් (CAT) යොමු කට්ටල ක්‍රමය (DNM-9602, බීජිං ප්‍රොන්ග් නිව් ටෙක්නොලොජි සමාගම, සීමාසහිත, නිෂ්පාදන ලියාපදිංචිය), අනුරූප මිනුම් කට්ටලය භාවිතා කරයි. අංකය: බීජිං ෆාමකොපොයියා (නිවැරදි) 2013 අංකය 2400147).
පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන් සාම්පලයෙන් ග්‍රෑම් 0.05 ක් පමණ බර කර නළයේ පැති දිගේ ඇන්ත්‍රෝන්-සල්ෆියුරික් අම්ල ප්‍රතික්‍රියාකාරකය එක් කරන්න. දියර හොඳින් මිශ්‍ර කිරීම සඳහා නළය තත්පර 2-3 ක් සොලවන්න. මිනිත්තු 15 ක් වර්ණය වර්ධනය කිරීම සඳහා නළය නල රාක්කයක් මත තබන්න. ද්‍රාව්‍ය සීනි ප්‍රමාණය 620 nm තරංග ආයාමයකින් පාරජම්බුල-දෘශ්‍ය වර්ණාවලීක්ෂමිතිය (UV-5800, ෂැංහයි යුවාන්සි උපකරණ සමාගම, සමාගම, චීනය) මගින් තීරණය කරන ලදී.
නැවුම් පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන්ග් සාම්පලයකින් ග්‍රෑම් 0.5ක් කිරා මැන, එය මිලි ලීටර් 5ක් ආසවනය කළ ජලය සමඟ සමජාතීය බවට අඹරා, පසුව ග්‍රෑම් 10,000ක දී විනාඩි 10ක් කේන්ද්‍රාපසාරී කරන්න. සුපිරි ද්‍රව්‍යය ස්ථාවර පරිමාවකට තනුක කරන ලදී. කූමාසි බ්‍රිලියන්ට් බ්ලූ ක්‍රමය භාවිතා කරන ලදී. ද්‍රාව්‍ය ප්‍රෝටීන් අන්තර්ගතය 595 nm තරංග ආයාමයකින් පාරජම්බුල-දෘශ්‍ය වර්ණාවලීක්ෂමිතිය (UV-5800, ෂැංහයි යුවාන්සි උපකරණ සමාගම, සමාගම, චීනය) භාවිතයෙන් මනිනු ලැබූ අතර ගව සෙරුම් ඇල්බියුමින් වල සම්මත වක්‍රය මත පදනම්ව ගණනය කරන ලදී.
නැවුම් සාම්පලයෙන් ග්‍රෑම් 0.5 ක් කිරා මැන, 10% ඇසිටික් අම්ලය මිලි ලීටර් 5 ක් එකතු කර, සමජාතීය වන තෙක් අඹරා, පෙරහන් කර නියත පරිමාවට තනුක කරන්න. වර්ණ සංවර්ධන ක්‍රමය නින්හයිඩ්‍රින් ද්‍රාවණයක් සමඟ භාවිතා කරන ලදී. නිදහස් ඇමයිනෝ අම්ල අන්තර්ගතය UV–දෘශ්‍ය වර්ණාවලීක්ෂමිතිය (UV-5800, ෂැංහයි යුවාන්සි උපකරණ සමාගම, සමාගම, චීනය) මගින් 570 nm දී තීරණය කරන ලද අතර ලියුසීන් සම්මත වක්‍රය මත පදනම්ව ගණනය කරන ලදී28.
නැවුම් සාම්පලයකින් 0.5 ග්රෑම් කිරා මැන, 3% සල්ෆොසැලිසිලික් අම්ල ද්‍රාවණයකින් මිලි ලීටර් 5 ක් එකතු කර, ජල ස්නානයක රත් කර විනාඩි 10 ක් සොලවන්න. සිසිලනයෙන් පසු, ද්‍රාවණය පෙරීම කර නියත පරිමාවකට ගෙන එන ලදී. අම්ල නින්හයිඩ්‍රින් සමඟ වර්ණමිතික ක්‍රමය භාවිතා කරන ලදී. 520 nm තරංග ආයාමයකින් පාරජම්බුල-දෘශ්‍ය වර්ණාවලීක්ෂ ඡායාරූපමිතිය (UV-5800, ෂැංහයි යුවාන්සි උපකරණ සමාගම, සමාගම, චීනය) මගින් ප්‍රෝලීන් අන්තර්ගතය තීරණය කරන ලද අතර ප්‍රෝලීන් සම්මත වක්‍රය මත පදනම්ව ගණනය කරන ලදී29.
මහජන චීන සමූහාණ්ඩුවේ ඖෂධවේදය (2015 සංස්කරණය) ආශ්‍රයෙන් ඉහළ කාර්යසාධනයක් සහිත ද්‍රව වර්ණදේහ විද්‍යාව මගින් සැපෝනින් අන්තර්ගතය තීරණය කරන ලදී. ඉහළ කාර්යසාධනයක් සහිත ද්‍රව වර්ණදේහ විද්‍යාවේ මූලික මූලධර්මය වන්නේ ජංගම අවධිය ලෙස අධි පීඩන ද්‍රව භාවිතා කිරීම සහ ස්ථාවර අවධියට ඉහළ කාර්යසාධනයක් සහිත තීරු වර්ණදේහ විද්‍යාවේ අතිශය සියුම් අංශු වෙන් කිරීමේ තාක්ෂණය යෙදීමයි. මෙහෙයුම් තාක්ෂණය පහත පරිදි වේ:
HPLC කොන්දේසි සහ පද්ධති යෝග්‍යතා පරීක්ෂණය (වගුව 1): පිරවුම ලෙස ඔක්ටඩෙසයිල්සිලේන් බන්ධිත සිලිකා ජෙල්, ජංගම අදියර A ලෙස ඇසිටොනයිට්‍රයිල් සහ ජංගම අදියර B ලෙස ජලය භාවිතා කරන්න. පහත වගුවේ දැක්වෙන පරිදි අනුක්‍රමික ඉවත් කිරීම සිදු කරන්න. හඳුනාගැනීමේ තරංග ආයාමය 203 nm වේ. පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන්ග් හි මුළු සැපෝනින් වල R1 උපරිමයට අනුව, න්‍යායාත්මක තහඩු ගණන අවම වශයෙන් 4000 ක් විය යුතුය.
සම්මත ද්‍රාවණය සකස් කිරීම: ජින්සෙනොසයිඩ් Rg1, ජින්සෙනොසයිඩ් Rb1 සහ නොටොජින්සෙනොසයිඩ් R1 නිවැරදිව කිරා මැන මෙතනෝල් එකතු කර ද්‍රාවණයේ 1 ml ට 0.4 mg ජින්සෙනොසයිඩ් Rg1, 0.4 mg ජින්සෙනොසයිඩ් Rb1 සහ 0.1 mg නොටොජින්සෙනොසයිඩ් R1 අඩංගු මිශ්‍රණයක් සකස් කරන්න.
පරීක්ෂණ ද්‍රාවණය සකස් කිරීම: පැනැක්ස් ජින්සෙන්ග් කුඩු ග්‍රෑම් 0.6 ක් බර කර මෙතනෝල් මිලි ලීටර් 50 ක් එක් කරන්න. මිශ්‍ර ද්‍රාවණය කිරා මැන (W1) එක රැයකින් තබන්න. ඉන්පසු මිශ්‍ර ද්‍රාවණය පැය 2 ක් 80°C උෂ්ණත්වයකදී ජල ස්නානයක මෘදු ලෙස තම්බා ගන්න. සිසිල් වූ පසු, මිශ්‍ර ද්‍රාවණය කිරා මැන සකස් කළ මෙතනෝල් පළමු ස්කන්ධය W1 ට එක් කරන්න. ඉන්පසු හොඳින් සොලවා පෙරහන් කරන්න. පෙරහන විශ්ලේෂණය සඳහා ඉතිරි වේ.
සැපොනින් 24 අන්තර්ගතය තීරණය කිරීම සඳහා සම්මත ද්‍රාවණයෙන් 10 μL ක් සහ පෙරහනෙන් 10 μL ක් නිවැරදිව එකතු කර ඉහළ ක්‍රියාකාරී ද්‍රව වර්ණදේහයකට (Thermo HPLC-ultimate 3000, Seymour Fisher Technology Co., Ltd.) එන්නත් කරන්න.
සම්මත වක්‍රය: Rg1, Rb1 සහ R1 මිශ්‍ර සම්මත ද්‍රාවණයක මැනීම. වර්ණදේහ තත්වයන් ඉහත ආකාරයටම වේ. y-අක්ෂයේ මනින ලද උච්ච ප්‍රදේශය සහ x-අක්ෂයේ සම්මත ද්‍රාවණයේ සැපෝනින් සාන්ද්‍රණය සටහන් කිරීමෙන් සම්මත වක්‍රය ගණනය කරන්න. සාම්පලයේ මනින ලද උච්ච ප්‍රදේශය සම්මත වක්‍රයට ආදේශ කිරීමෙන් සැපෝනින් සාන්ද්‍රණය ගණනය කළ හැකිය.
P. notogensings සාම්පලයෙන් 0.1 g ක් කිරා මැන බලා 70% CH3OH ද්‍රාවණයෙන් මිලි ලීටර් 50 ක් එකතු කරන්න. අතිධ්වනික නිස්සාරණය පැය 2 ක් සඳහා සිදු කරන ලද අතර, පසුව විනාඩි 10 ක් සඳහා 4000 rpm හි කේන්ද්‍රාපසාරීකරණය සිදු කරන ලදී. සුපර්නැටන්ට් මිලි ලීටර් 1 ක් ගෙන එය 12 වතාවක් තනුක කරන්න. ෆ්ලේවනොයිඩ් අන්තර්ගතය තීරණය කරනු ලැබුවේ 249 nm තරංග ආයාමයකින් පාරජම්බුල-දෘශ්‍ය වර්ණාවලීක්ෂමිතිය (UV-5800, ෂැංහයි යුවාන්සි උපකරණ සමාගම, සමාගම, චීනය) භාවිතා කරමිනි. ක්වෙර්සෙටින් යනු සම්මත පොදු ද්‍රව්‍යවලින් එකකි8.
දත්ත සංවිධානය කරන ලද්දේ එක්සෙල් 2010 මෘදුකාංගය භාවිතා කරමිනි. දත්තවල විචලනය විශ්ලේෂණය කිරීම සඳහා SPSS 20 සංඛ්‍යානමය මෘදුකාංගය භාවිතා කරන ලදී. Origin Pro 9.1 භාවිතයෙන් පින්තූර අඳින ලදී. ගණනය කරන ලද සංඛ්‍යානමය අගයන්ට මධ්‍යන්‍යය ± SD ඇතුළත් වේ. සංඛ්‍යානමය වැදගත්කම පිළිබඳ ප්‍රකාශ P < 0.05 මත පදනම් වේ.
කොළ මත ඉසින ලද ඔක්සලික් අම්ලයේ එකම සාන්ද්‍රණයේදී, පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන්ග් වල මුල්වල Ca අන්තර්ගතය සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි වූ අතර දෙහි ප්‍රමාණය වැඩි විය (වගුව 2). දෙහි නොමැතිකම හා සසඳන විට, ඔක්සලික් අම්ලය ඉසීමෙන් තොරව දෙහි 3750 kg/h/m2 එකතු කළ විට Ca අන්තර්ගතය 212% කින් වැඩි විය. යොදන ලද දෙහි ප්‍රමාණයටම, ඔක්සලික් අම්ල ඉසින සාන්ද්‍රණය වැඩි වූ විට Ca අන්තර්ගතය තරමක් වැඩි විය.
මුල්වල Cd අන්තර්ගතය 0.22 සිට 0.70 mg kg-1 දක්වා පරාසයක පවතී. ඔක්සලික් අම්ලයේ එකම ඉසින සාන්ද්‍රණයේදී, දෙහි එකතු කරන ප්‍රමාණය වැඩි වන විට, 2250 kg/h Cd අන්තර්ගතය සැලකිය යුතු ලෙස අඩු වේ. පාලනයට සාපේක්ෂව, 2250 kg hm-2 දෙහි සහ 0.1 mol l-1 ඔක්සලික් අම්ලය ඉසීමෙන් පසු මුල්වල Cd අන්තර්ගතය 68.57% කින් අඩු විය. දෙහි රහිත සහ 750 kg/h දෙහි යොදන විට, ඔක්සලික් අම්ල ඉසින සාන්ද්‍රණය වැඩි වීමත් සමඟ Panax notoginseng හි මුල්වල Cd අන්තර්ගතය සැලකිය යුතු ලෙස අඩු විය. 2250 kg/m2 දෙහි සහ 3750 kg/m2 දෙහි යොදන විට, මූල Cd අන්තර්ගතය පළමුව අඩු වූ අතර පසුව ඔක්සලික් අම්ල සාන්ද්‍රණය වැඩි වීමත් සමඟ වැඩි විය. ඊට අමතරව, ද්විවිචල්‍ය විශ්ලේෂණයෙන් පෙන්නුම් කළේ දෙහි, පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන් මුල්වල Ca අන්තර්ගතයට සැලකිය යුතු බලපෑමක් ඇති කළ බවයි (F = 82.84**), දෙහි, පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන් මුල්වල Cd අන්තර්ගතයට සැලකිය යුතු බලපෑමක් ඇති කළේය (F = 74.99**), සහ ඔක්සලික් අම්ලය. අම්ලය (F=7.72*).
එකතු කරන ලද දෙහි ප්‍රමාණය සහ ඉසින ලද ඔක්සලික් අම්ලයේ සාන්ද්‍රණය වැඩි වන විට, MDA අන්තර්ගතය සැලකිය යුතු ලෙස අඩු විය. දෙහි එකතු කිරීමකින් තොරව සහ දෙහි 3750 kg/m2 එකතු කිරීමෙන් තොරව Panax notoginseng හි මුල්වල MDA අන්තර්ගතයේ සැලකිය යුතු වෙනසක් නොතිබුණි. 750 kg/h/m2 සහ 2250 kg/h/m2 යෙදීමේ අනුපාතවලදී, 0.2 mol/L ඔක්සලික් අම්ල ඉසින ප්‍රතිකාරයේ දෙහි අන්තර්ගතය පිළිවෙලින් 58.38% සහ 40.21% කින් අඩු විය, ඔක්සලික් අම්ල ඉසින ප්‍රතිකාරයක් නොමැති විට. 750 kg hm-2 දෙහි සහ 0.2 mol l-1 ඔක්සලික් අම්ලය ඉසින විට අඩුම MDA අන්තර්ගතය (7.57 nmol g-1) නිරීක්ෂණය විය (රූපය 1).
කැඩ්මියම් ආතතිය යටතේ පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන්ග් මුල්වල මැලොන්ඩියල්ඩිහයිඩ් අන්තර්ගතයට ඔක්සලික් අම්ලය සමඟ පත්‍ර ඉසීමේ බලපෑම. සටහන: රූපයේ පුරාවෘත්තය ඉසින විට ඔක්සලික් අම්ලයේ සාන්ද්‍රණය (mol L-1) පෙන්නුම් කරයි, විවිධ කුඩා අකුරු එකම දෙහි යෙදීමේ ප්‍රතිකාර අතර සැලකිය යුතු වෙනස්කම් දක්වයි. අංකය (P < 0.05). පහතින් ද එසේමය.
පැයට කිලෝග්‍රෑම් 3750 ක දෙහි යෙදීම හැරුණු විට, පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන්ග් මුල්වල SOD ක්‍රියාකාරිත්වයේ සැලකිය යුතු වෙනසක් දක්නට නොලැබුණි. දෙහි 0, 750 සහ 2250 kg/h/m2 එකතු කරන විට, ඔක්සලික් අම්ලය 0.2 mol/l සාන්ද්‍රණයකින් ඉසීමෙන් ප්‍රතිකාර කළ විට SOD ක්‍රියාකාරිත්වය ඔක්සලික් අම්ලය භාවිතයෙන් තොරව වඩා සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි වූ අතර පිළිවෙලින් 177.89%, 61.62% සහ 45.08% කින් වැඩි විය. දෙහි යෙදීමක් නොමැති විට සහ 0.2 mol/l සාන්ද්‍රණයකින් ඔක්සලික් අම්ලය ඉසීමෙන් ප්‍රතිකාර කළ විට මුල්වල SOD ක්‍රියාකාරිත්වය (598.18 U g-1) ඉහළම විය. ඔක්සලික් අම්ලය එකම සාන්ද්‍රණයකින් හෝ 0.1 mol L-1 කින් ඉසින විට, දෙහි එකතු කරන ලද ප්‍රමාණය වැඩි වීමත් සමඟ SOD ක්‍රියාකාරිත්වය වැඩි විය. ඔක්සලික් අම්ලය 0.2 mol/L සමඟ ඉසීමෙන් පසු, SOD ක්‍රියාකාරිත්වය සැලකිය යුතු ලෙස අඩු විය (රූපය 2).
කැඩ්මියම් ආතතිය යටතේ පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන්ග් වල මුල්වල සුපර්ඔක්සයිඩ් ඩිස්මියුටේස්, පෙරොක්සිඩේස් සහ කැටලේස් ක්‍රියාකාරිත්වයට ඔක්සලික් අම්ලය කොළ ඉසීමේ බලපෑම.
මුල්වල SOD ක්‍රියාකාරිත්වය මෙන්, දෙහි නොමැතිව ප්‍රතිකාර කර 0.2 mol L-1 ඔක්සලික් අම්ලය ඉසින ලද මුල්වල POD ක්‍රියාකාරිත්වය ඉහළම විය (63.33 µmol g-1), එය පාලනයට වඩා 148.35% වැඩිය (25.50 µmol g-1). ඔක්සලික් අම්ල ඉසින සාන්ද්‍රණය වැඩි වීම සහ 3750 kg/m2 දෙහි ප්‍රතිකාරය සමඟ, POD ක්‍රියාකාරිත්වය පළමුව වැඩි වූ අතර පසුව අඩු විය. 0.1 mol L-1 ඔක්සලික් අම්ලය සමඟ ප්‍රතිකාර කිරීම හා සසඳන විට, 0.2 mol L-1 ඔක්සලික් අම්ලය සමඟ ප්‍රතිකාර කළ විට POD ක්‍රියාකාරිත්වය 36.31% කින් අඩු විය (රූපය 2).
ඔක්සලික් අම්ලය 0.2 mol/l ඉසීම සහ 2250 kg/h/m2 හෝ 3750 kg/h/m2 දෙහි එකතු කිරීම හැරුණු විට, CAT ක්‍රියාකාරිත්වය පාලනයට වඩා සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි විය. ඔක්සලික් අම්ලය 0.1 mol/l ඉසීම සහ 0.2250 kg/m2 හෝ 3750 kg/h/m2 දෙහි එකතු කිරීමේදී, ඔක්සලික් අම්ලය ඉසීමෙන් තොරව ප්‍රතිකාර කිරීම හා සසඳන විට CAT ක්‍රියාකාරිත්වය පිළිවෙලින් 276.08%, 276.69% සහ 33.05% කින් වැඩි විය. දෙහි රහිත ප්‍රතිකාරයේදී සහ 0.2 mol/L ඔක්සලික් අම්ල ප්‍රතිකාරයේදී මුල්වල CAT ක්‍රියාකාරිත්වය ඉහළම (803.52 μmol/g) විය. දෙහි 3750 kg/h/m සහ 0.2 mol/L ඔක්සලික් අම්ලය සමඟ ප්‍රතිකාර කළ විට CAT ක්‍රියාකාරිත්වය අඩුම (172.88 μmol/g) විය (රූපය 2).
ද්විවිචල්‍ය විශ්ලේෂණයෙන් පෙන්නුම් කළේ පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන්ග් මුල්වල CAT ක්‍රියාකාරිත්වය සහ MDA ක්‍රියාකාරිත්වය ඉසින ලද ඔක්සලික් අම්ලය හෝ දෙහි ප්‍රමාණය සහ ප්‍රතිකාර දෙක සමඟ සැලකිය යුතු ලෙස සම්බන්ධ වී ඇති බවයි (වගුව 3). මුල්වල SOD ක්‍රියාකාරිත්වය දෙහි සහ ඔක්සලික් අම්ල ප්‍රතිකාරය හෝ ඔක්සලික් අම්ල ඉසින සාන්ද්‍රණය සමඟ සැලකිය යුතු ලෙස සම්බන්ධ විය. මූල POD ක්‍රියාකාරිත්වය සැලකිය යුතු ලෙස රඳා පවතින්නේ යොදන ලද දෙහි ප්‍රමාණය හෝ දෙහි සහ ඔක්සලික් අම්ල ප්‍රතිකාරය මත ය.
දෙහි යෙදීමේ ප්‍රමාණය වැඩි වීම සහ ඔක්සලික් අම්ල ඉසින සාන්ද්‍රණය වැඩි වීමත් සමඟ මුල්වල ද්‍රාව්‍ය සීනි ප්‍රමාණය අඩු විය. දෙහි යෙදීමකින් තොරව පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන්ග් මුල්වල සහ දෙහි කිලෝග්‍රෑම් 750/h/m2 යොදන විට ද්‍රාව්‍ය සීනි ප්‍රමාණයේ සැලකිය යුතු වෙනසක් නොතිබුණි. දෙහි 2250 kg/m2 යොදන විට, 0.2 mol/L ඔක්සලික් අම්ලය සමඟ ප්‍රතිකාර කළ විට ද්‍රාව්‍ය සීනි ප්‍රමාණය ඔක්සලික් අම්ලය ඉසීමෙන් තොරව ප්‍රතිකාර කළ විට වඩා සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි වූ අතර එය 22.81% කින් වැඩි විය. දෙහි 3750 kg h/m2 යොදන විට, ඉසින ලද ඔක්සලික් අම්ලයේ සාන්ද්‍රණය වැඩි වූ විට ද්‍රාව්‍ය සීනි ප්‍රමාණය සැලකිය යුතු ලෙස අඩු විය. ඔක්සලික් අම්ලය ඉසීමෙන් තොරව ප්‍රතිකාර කළ විට 0.2 mol L-1 ඔක්සලික් අම්ලය සමඟ ප්‍රතිකාර කළ විට ද්‍රාව්‍ය සීනි ප්‍රමාණය 38.77% කින් අඩු විය. ඊට අමතරව, 0.2 mol·L-1 ඔක්සලික් අම්ල ඉසින ප්‍රතිකාරයේ අවම ද්‍රාව්‍ය සීනි ප්‍රමාණය තිබුණි, එය 205.80 mg·g-1 විය (රූපය 3).
කැඩ්මියම් ආතතිය යටතේ පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන් මුල්වල ද්‍රාව්‍ය සම්පූර්ණ සීනි සහ ද්‍රාව්‍ය ප්‍රෝටීන අන්තර්ගතයට ඔක්සලික් අම්ලය පත්‍ර ඉසීමේ බලපෑම.
දෙහි යෙදීමේ ප්‍රමාණය වැඩි වීම සහ ඔක්සලික් අම්ල ඉසින ප්‍රතිකාරය සමඟ මුල්වල ද්‍රාව්‍ය ප්‍රෝටීන් අන්තර්ගතය අඩු විය. දෙහි එකතු කිරීමකින් තොරව, 0.2 mol L-1 සාන්ද්‍රණයකින් ඔක්සලික් අම්ල ඉසින සමඟ ප්‍රතිකාර කළ විට ද්‍රාව්‍ය ප්‍රෝටීන් අන්තර්ගතය පාලනයට සාපේක්ෂව 16.20% කින් සැලකිය යුතු ලෙස අඩු විය. දෙහි 750 kg/h/m2 යෙදීමේ කොන්දේසි යටතේ, 0.2 mol/L ඔක්සලික් අම්ල ඉසින ප්‍රතිකාරයේ ද්‍රාව්‍ය ප්‍රෝටීන් අන්තර්ගතය ඔක්සලික් අම්ල ඉසින ප්‍රතිකාරයට වඩා සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි විය (35.11%). දෙහි 3750 kg·h/m2 යොදන විට, ඔක්සලික් අම්ල ඉසින සාන්ද්‍රණය වැඩි වූ විට ද්‍රාව්‍ය ප්‍රෝටීන් අන්තර්ගතය සැලකිය යුතු ලෙස අඩු විය, ඔක්සලික් අම්ල ඉසින 0.2 mol·L-1 වූ විට අවම ද්‍රාව්‍ය ප්‍රෝටීන් අන්තර්ගතය (269.84 μg·g-1). ප්රතිකාර (රූපය 3).
දෙහි යෙදීමක් නොමැති විට පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන්ග් මූලයේ නිදහස් ඇමයිනෝ අම්ල අන්තර්ගතයේ සැලකිය යුතු වෙනස්කම් නොමැත. ඔක්සලික් අම්ලයේ ඉසින සාන්ද්‍රණය වැඩි වූ විට සහ දෙහි 750 kg/h/m2 එකතු කළ විට, නිදහස් ඇමයිනෝ අම්ල අන්තර්ගතය පළමුව අඩු වී පසුව වැඩි විය. ඔක්සලික් අම්ලය ඉසීමෙන් තොරව කළ ප්‍රතිකාරය හා සසඳන විට, 2250 kg hm-2 දෙහි සහ 0.2 mol l-1 ඔක්සලික් අම්ලය ඉසින විට නිදහස් ඇමයිනෝ අම්ල අන්තර්ගතය 33.58% කින් සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි විය. ඔක්සලික් අම්ලයේ ඉසින සාන්ද්‍රණය වැඩි වීම සහ දෙහි 3750 kg/m2 එකතු කිරීමත් සමඟ නිදහස් ඇමයිනෝ අම්ල අන්තර්ගතය සැලකිය යුතු ලෙස අඩු විය. ඔක්සලික් අම්ල නොවන ඉසින ප්‍රතිකාරයට සාපේක්ෂව 0.2 mol L-1 ඔක්සලික් අම්ල ඉසින ප්‍රතිකාරයේ නිදහස් ඇමයිනෝ අම්ල අන්තර්ගතය 49.76% කින් අඩු විය. ඔක්සලික් අම්ල ඉසින නොමැතිව නිදහස් ඇමයිනෝ අම්ල අන්තර්ගතය ඉහළම වූ අතර එය 2.09 mg g-1 විය. 0.2 mol/L ඔක්සලික් අම්ල ඉසින ප්‍රතිකාරයේ අවම නිදහස් ඇමයිනෝ අම්ල අන්තර්ගතය (1.05 mg/g) තිබුණි (රූපය 4).
කැඩ්මියම් ආතති තත්වයන් යටතේ පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන්ග් වල මුල්වල නිදහස් ඇමයිනෝ අම්ල සහ ප්‍රෝලීන් අන්තර්ගතයට ඔක්සලික් අම්ලය සමඟ කොළ ඉසීමේ බලපෑම.
යොදන ලද දෙහි ප්‍රමාණය සහ ඔක්සලික් අම්ලය ඉසීමේ ප්‍රමාණය වැඩිවීමත් සමඟ මුල්වල ප්‍රෝලීන් අන්තර්ගතය අඩු විය. දෙහි නොයෙදූ විට පැනැක්ස් ජින්සෙන්ග් මූලයේ ප්‍රෝලීන් අන්තර්ගතයේ සැලකිය යුතු වෙනස්කම් දක්නට නොලැබුණි. ඔක්සලික් අම්ලයේ ඉසින සාන්ද්‍රණය වැඩි වූ විට සහ දෙහි 750 හෝ 2250 kg/m2 යෙදීම වැඩි වූ විට, ප්‍රෝලීන් අන්තර්ගතය පළමුව අඩු වී පසුව වැඩි විය. 0.2 mol L-1 ඔක්සලික් අම්ල ඉසින ප්‍රතිකාරයේ ප්‍රෝලීන් අන්තර්ගතය 0.1 mol L-1 ඔක්සලික් අම්ල ඉසින ප්‍රතිකාරයට වඩා සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි වූ අතර එය පිළිවෙලින් 19.52% සහ 44.33% කින් වැඩි විය. දෙහි 3750 kg/m2 එකතු කළ විට, ඉසින ලද ඔක්සලික් අම්ලයේ සාන්ද්‍රණය වැඩි වූ විට ප්‍රෝලීන් අන්තර්ගතය සැලකිය යුතු ලෙස අඩු විය. 0.2 mol L-1 ඔක්සලික් අම්ලය ඉසීමෙන් පසු, ඔක්සලික් අම්ලය ඉසීමෙන් තොරව ප්‍රෝලීන් අන්තර්ගතය 54.68% කින් අඩු විය. 0.2 mol/l ඔක්සලික් අම්ලය සමඟ ප්‍රතිකාර කළ විට අඩුම ප්‍රෝලීන් අන්තර්ගතය වූ අතර එය 11.37 μg/g විය (රූපය 4).
Panax notoginseng හි මුළු සැපෝනින් අන්තර්ගතය Rg1>Rb1>R1 වේ. ඔක්සලික් අම්ල ඉසින සාන්ද්‍රණය වැඩි වීම සහ දෙහි යෙදීමකින් තොරව සාන්ද්‍රණය වැඩි වීමත් සමඟ සැපෝනින් තුනේ අන්තර්ගතයේ සැලකිය යුතු වෙනසක් නොතිබුණි (වගුව 4).
ඔක්සලික් අම්ලය ඉසීමෙන් පසු 0.2 mol L-1 ඔක්සලික් අම්ලය ඉසීමෙන් පසු R1 අන්තර්ගතය සහ 750 හෝ 3750 kg/m2 දෙහි මාත්‍රාවක් යෙදීමෙන් පසු එය සැලකිය යුතු ලෙස අඩු විය. 0 හෝ 0.1 mol/L ඉසින ලද ඔක්සලික් අම්ල සාන්ද්‍රණයකදී, දෙහි එකතු කරන ප්‍රමාණය වැඩි වීමත් සමඟ R1 අන්තර්ගතයේ සැලකිය යුතු වෙනසක් නොතිබුණි. 0.2 mol/L ඔක්සලික් අම්ලය ඉසින සාන්ද්‍රණයකදී, දෙහි 3750 kg/h/m2 හි R1 අන්තර්ගතය දෙහි එකතු නොකර 43.84% ට වඩා සැලකිය යුතු ලෙස අඩු විය (වගුව 4).
ඔක්සලික් අම්ලයේ ඉසින සාන්ද්‍රණය වැඩි වී දෙහි කිලෝග්‍රෑම් 750/m2 එකතු කළ විට, Rg1 අන්තර්ගතය මුලින්ම වැඩි වී පසුව අඩු විය. 2250 සහ 3750 kg/h දෙහි යෙදුම් අනුපාතවලදී, ඔක්සලික් අම්ල ඉසින සාන්ද්‍රණය වැඩි වීමත් සමඟ Rg1 අන්තර්ගතය අඩු විය. ඉසින ලද ඔක්සලික් අම්ලයේ එකම සාන්ද්‍රණයේදී, දෙහි ප්‍රමාණය වැඩි වන විට, Rg1 අන්තර්ගතය පළමුව වැඩි වන අතර පසුව අඩු වේ. පාලනය සමඟ සසඳන විට, ඔක්සලික් අම්ලයේ සාන්ද්‍රණ තුනක සහ 750 kg/m2 දෙහි ප්‍රතිකාරවල Rg1 අන්තර්ගතය හැර, පාලනයට වඩා වැඩි වූ අතර, අනෙකුත් ප්‍රතිකාරවල පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන්ග් මුල්වල Rg1 අන්තර්ගතය පාලනයට වඩා අඩු විය. Rg1 හි උපරිම අන්තර්ගතය වූයේ දෙහි කිලෝග්‍රෑම් 750/h/m2 සහ ඔක්සලික් අම්ලය 0.1 mol/l ඉසින විටය, එය පාලනයට වඩා 11.54% වැඩි විය (වගුව 4).
ඔක්සලික් අම්ලයේ ඉසින සාන්ද්‍රණය සහ යොදන ලද දෙහි ප්‍රමාණය 2250 kg/h ප්‍රවාහ අනුපාතයකින් වැඩි වූ විට, Rb1 අන්තර්ගතය පළමුව වැඩි වී පසුව අඩු විය. 0.1 mol L-1 ඔක්සලික් අම්ලය ඉසීමෙන් පසු, Rb1 අන්තර්ගතය උපරිම අගය 3.46% දක්වා ළඟා වූ අතර එය ඔක්සලික් අම්ලය ඉසීමෙන් තොරව වඩා 74.75% කින් වැඩි විය. අනෙකුත් දෙහි ප්‍රතිකාර සඳහා, ඔක්සලික් අම්ල ඉසිනයේ විවිධ සාන්ද්‍රණයන් අතර සැලකිය යුතු වෙනස්කම් නොතිබුණි. 0.1 සහ 0.2 mol L-1 ඔක්සලික් අම්ලය සමඟ ඉසීමෙන් පසු, දෙහි ප්‍රමාණය වැඩි වූ විට, Rb1 අන්තර්ගතය පළමුව අඩු වී පසුව අඩු විය (වගුව 4).
ඔක්සලික් අම්ලය සමඟ එකම ඉසින සාන්ද්‍රණයේදී, දෙහි එකතු කරන ප්‍රමාණය වැඩි වන විට, ෆ්ලේවනොයිඩ් වල අන්තර්ගතය පළමුව වැඩි වී පසුව අඩු විය. දෙහි නොමැතිව ඔක්සලික් අම්ලයේ විවිධ සාන්ද්‍රණයන් සහ දෙහි 3750 kg/m2 ඉසීමේදී ෆ්ලේවනොයිඩ් වල අන්තර්ගතයේ සැලකිය යුතු වෙනසක් අනාවරණය නොවීය. දෙහි 750 සහ 2250 kg/m2 එකතු කරන විට, ඉසින ලද ඔක්සලික් අම්ලයේ සාන්ද්‍රණය වැඩි වන විට, ෆ්ලේවනොයිඩ් වල අන්තර්ගතය පළමුව වැඩි වී පසුව අඩු විය. 750 kg/m2 යොදන විට සහ 0.1 mol/l සාන්ද්‍රණයකින් ඔක්සලික් අම්ලය ඉසීමේදී, ෆ්ලේවනොයිඩ් වල අන්තර්ගතය උපරිම විය - 4.38 mg/g, එය එකම දෙහි ප්‍රමාණයක් එකතු කරන විට වඩා 18.38% වැඩි වන අතර ඔක්සලික් අම්ලය ඉසීමට අවශ්‍ය නොවීය. ඔක්සලික් අම්ලය නොමැතිව ප්‍රතිකාර කිරීම සහ 2250 kg/m2 මාත්‍රාවකින් දෙහි සමඟ ප්‍රතිකාර කිරීම හා සසඳන විට 0.1 mol L-1 ඔක්සලික් අම්ල ඉසින සමඟ ප්‍රතිකාර කළ විට ෆ්ලේවනොයිඩ් අන්තර්ගතය 21.74% කින් වැඩි විය (රූපය 5).
කැඩ්මියම් ආතතිය යටතේ පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන්ග් මූලයේ ඇති ෆ්ලේවනොයිඩ් අන්තර්ගතයට ඔක්සලේට් කොළ ඉසීමේ බලපෑම.
ද්විවාරිතා විශ්ලේෂණයෙන් පෙන්නුම් කළේ පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන්ග් මුල්වල ද්‍රාව්‍ය සීනි ප්‍රමාණය යොදන ලද දෙහි ප්‍රමාණය සහ ඉසින ලද ඔක්සලික් අම්ලයේ සාන්ද්‍රණය මත සැලකිය යුතු ලෙස රඳා පවතින බවයි. මුල්වල ද්‍රාව්‍ය ප්‍රෝටීන වල අන්තර්ගතය දෙහි සහ ඔක්සලික් අම්ලයේ මාත්‍රාව සමඟ සැලකිය යුතු ලෙස සහසම්බන්ධ විය. මුල්වල නිදහස් ඇමයිනෝ අම්ල සහ ප්‍රෝලීන් වල අන්තර්ගතය යොදන ලද දෙහි ප්‍රමාණය, ඔක්සලික් අම්ලය, දෙහි සහ ඔක්සලික් අම්ලය ඉසීමේ සාන්ද්‍රණය සමඟ සැලකිය යුතු ලෙස සහසම්බන්ධ විය (වගුව 5).
පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන්ග් මුල්වල R1 අන්තර්ගතය ඉසින ලද ඔක්සලික් අම්ලයේ සාන්ද්‍රණය, යොදන ලද දෙහි, දෙහි සහ ඔක්සලික් අම්ල ප්‍රමාණය මත සැලකිය යුතු ලෙස රඳා පැවතුනි. ෆ්ලේවනොයිඩ් වල අන්තර්ගතය ඔක්සලික් අම්ල ඉසින සාන්ද්‍රණය සහ එකතු කරන ලද දෙහි ප්‍රමාණය මත සැලකිය යුතු ලෙස රඳා පැවතුනි.
පසෙහි කැඩ්මියම් සවි කිරීම මගින් ශාකවල කැඩ්මියම් මට්ටම අඩු කිරීම සඳහා දෙහි සහ ඔක්සලික් අම්ලය වැනි බොහෝ සංශෝධන භාවිතා කර ඇත30. බෝග වල කැඩ්මියම් මට්ටම අඩු කිරීම සඳහා පස සංශෝධනයක් ලෙස දෙහි බහුලව භාවිතා වේ31. බැර ලෝහ වලින් දූෂිත පසට ප්‍රතිකාර කිරීම සඳහා ඔක්සලික් අම්ලය ද භාවිතා කළ හැකි බව ලියැං සහ තවත් අය 32 වාර්තා කළහ. දූෂිත පසට විවිධ ඔක්සලික් අම්ලයේ සාන්ද්‍රණයන් එකතු කිරීමෙන් පසු, පසෙහි කාබනික ද්‍රව්‍ය ප්‍රමාණය වැඩි විය, කැටායන හුවමාරු ධාරිතාව අඩු විය සහ pH අගය වැඩි විය33. ඔක්සලික් අම්ලය පසෙහි ලෝහ අයන සමඟ ද ප්‍රතික්‍රියා කළ හැකිය. Cd ආතති තත්වයන් යටතේ, පාලනයට සාපේක්ෂව Panax notoginseng හි Cd අන්තර්ගතය සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි විය. කෙසේ වෙතත්, දෙහි භාවිතා කරන්නේ නම්, එය සැලකිය යුතු ලෙස අඩු වේ. මෙම අධ්‍යයනයේදී දෙහි 750 kg/h/m2 යොදන විට, මුල්වල Cd අන්තර්ගතය ජාතික ප්‍රමිතියට ළඟා විය (Cd සීමාව Cd≤0.5 mg/kg, AQSIQ, GB/T 19086-200834), සහ බලපෑම යහපත් විය. . හොඳම බලපෑම ලබා ගත හැක්කේ දෙහි 2250 kg/m2 එකතු කිරීමෙනි. දෙහි එකතු කිරීම පසෙහි Ca2+ සහ Cd2+ සඳහා තරඟකාරී ස්ථාන විශාල සංඛ්‍යාවක් නිර්මාණය කරන අතර ඔක්සලික් අම්ලය එකතු කිරීම පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන්ග් හි මුල්වල Cd අන්තර්ගතය අඩු කරයි. දෙහි සහ ඔක්සලික් අම්ලය මිශ්‍ර කිරීමෙන් පසු, පැනැක්ස් ජින්සෙන්ග් මූලයේ Cd අන්තර්ගතය සැලකිය යුතු ලෙස අඩු වී ජාතික ප්‍රමිතියට ළඟා විය. පසෙහි Ca2+ ස්කන්ධ ප්‍රවාහ ක්‍රියාවලියක් හරහා මූල මතුපිටට අවශෝෂණය කර කැල්සියම් නාලිකා (Ca2+ නාලිකා), කැල්සියම් පොම්ප (Ca2+-AT-Pase) සහ Ca2+/H+ ප්‍රතිපෝටර් හරහා මූල සෛල තුළට අවශෝෂණය කර, පසුව තිරස් අතට ප්‍රවාහනය කළ හැකිය. මුල්වලට. Xylem23. මුල්වල Ca සහ Cd අන්තර්ගතය අතර සැලකිය යුතු සෘණ සහසම්බන්ධයක් තිබුණි (P < 0.05). Ca අන්තර්ගතය වැඩි වීමත් සමඟ Cd අන්තර්ගතය අඩු වූ අතර එය Ca සහ Cd අතර ප්‍රතිවිරෝධතාව පිළිබඳ අදහසට අනුකූල වේ. Panax notoginseng මූලයේ Ca අන්තර්ගතයට දෙහි ප්‍රමාණය සැලකිය යුතු බලපෑමක් ඇති කළ බව ANOVA පෙන්වා දුන්නේය. පොන්ග්‍රැක් සහ තවත් අය 35 වාර්තා කළේ කැල්සියම් ඔක්සලේට් ස්ඵටිකවල Cd ඔක්සලේට් සමඟ බන්ධනය වී Ca සමඟ තරඟ කරන බවයි. කෙසේ වෙතත්, Ca මත ඔක්සලික් අම්ලයේ නියාමන බලපෑම නොසැලකිය. මෙයින් පෙනී යන්නේ ඔක්සලික් අම්ලය සහ Ca2+ වලින් කැල්සියම් ඔක්සලේට් අවක්ෂේපණය කිරීම සරල වර්ෂාපතනයක් නොවන බවත්, සහ-වර්ෂාපතන ක්‍රියාවලිය පරිවෘත්තීය මාර්ග කිහිපයකින් පාලනය කළ හැකි බවත්ය.
කැඩ්මියම් ආතතිය යටතේ, ශාකවල ප්‍රතික්‍රියාශීලී ඔක්සිජන් විශේෂ (ROS) විශාල ප්‍රමාණයක් සෑදී ඇති අතර එය සෛල පටලවල ව්‍යුහයට හානි කරයි36. මැලොන්ඩියල්ඩිහයිඩ් (MDA) අන්තර්ගතය ROS මට්ටම සහ ශාකවල ප්ලාස්මා පටලයට සිදුවන හානියේ ප්‍රමාණය විනිශ්චය කිරීමට දර්ශකයක් ලෙස භාවිතා කළ හැකිය37. ප්‍රතිඔක්සිකාරක පද්ධතිය ප්‍රතික්‍රියාශීලී ඔක්සිජන් විශේෂ ඉවත් කිරීම සඳහා වැදගත් ආරක්ෂක යාන්ත්‍රණයකි38. ප්‍රතිඔක්සිකාරක එන්සයිමවල (POD, SOD සහ CAT ඇතුළුව) ක්‍රියාකාරකම් සාමාන්‍යයෙන් කැඩ්මියම් ආතතිය මගින් වෙනස් වේ. ප්‍රතිඵලවලින් පෙන්නුම් කළේ MDA අන්තර්ගතය Cd සාන්ද්‍රණය සමඟ ධනාත්මකව සහසම්බන්ධ වී ඇති බවයි, එයින් පෙන්නුම් කරන්නේ Cd සාන්ද්‍රණය වැඩිවීමත් සමඟ ශාක පටල ලිපිඩ පෙරොක්සයිඩ් ප්‍රමාණය ගැඹුරු වන බවයි37. මෙය Ouyang et al විසින් කරන ලද අධ්‍යයනයේ ප්‍රතිඵලවලට අනුකූල වේ39. මෙම අධ්‍යයනයෙන් පෙන්නුම් කරන්නේ MDA අන්තර්ගතය දෙහි, ඔක්සලික් අම්ලය, දෙහි සහ ඔක්සලික් අම්ලය මගින් සැලකිය යුතු ලෙස බලපාන බවයි. 0.1 mol L-1 ඔක්සලික් අම්ලය නිහාරිකකරණය කිරීමෙන් පසු, පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන්ග් හි MDA අන්තර්ගතය අඩු වූ අතර, එයින් පෙන්නුම් කළේ ඔක්සලික් අම්ලය පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන්ග් හි Cd සහ ROS මට්ටම්වල ජෛව උපයෝගීතාව අඩු කළ හැකි බවයි. ප්‍රතිඔක්සිකාරක එන්සයිම පද්ධතිය යනු ශාකයේ විෂ ඉවත් කිරීමේ ක්‍රියාකාරිත්වය සිදුවන ස්ථානයයි. SOD ශාක සෛලවල අඩංගු O2- ඉවත් කර විෂ නොවන O2 සහ අඩු විෂ සහිත H2O2 නිපදවයි. POD සහ CAT ශාක පටක වලින් H2O2 ඉවත් කර H2O2 H2O බවට වියෝජනය උත්ප්‍රේරණය කරයි. iTRAQ ප්‍රෝටියෝම් විශ්ලේෂණය මත පදනම්ව, Cd40 ආතතිය යටතේ දෙහි යෙදීමෙන් පසු SOD සහ PAL වල ප්‍රෝටීන් ප්‍රකාශන මට්ටම් අඩු වී ඇති බවත් POD හි ප්‍රකාශන මට්ටම වැඩි වී ඇති බවත් සොයා ගන්නා ලදී. පැනැක්ස් නොටොජින්සෙන්ග් මූලයේ CAT, SOD සහ POD වල ක්‍රියාකාරකම් ඔක්සලික් අම්ලය සහ දෙහි මාත්‍රාව මගින් සැලකිය යුතු ලෙස බලපා ඇත. 0.1 mol L-1 ඔක්සලික් අම්ලය සමඟ ඉසින ප්‍රතිකාර කිරීම SOD සහ CAT වල ක්‍රියාකාරිත්වය සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි කළ නමුත් POD ක්‍රියාකාරිත්වයට නියාමන බලපෑම පැහැදිලි නොවීය. මෙයින් පෙනී යන්නේ ඔක්සලික් අම්ලය Cd ආතතිය යටතේ ROS වියෝජනය වේගවත් කරන බවත් ප්‍රධාන වශයෙන් CAT හි ක්‍රියාකාරිත්වය නියාමනය කිරීමෙන් H2O2 ඉවත් කිරීම සම්පූර්ණ කරන බවත්ය, එය Pseudospermum sibiricum හි ප්‍රතිඔක්සිකාරක එන්සයිම පිළිබඳ Guo et al.41 හි පර්යේෂණ ප්‍රතිඵලවලට සමාන වේ. කොස්. ). ප්‍රතිඔක්සිකාරක පද්ධතියේ එන්සයිමවල ක්‍රියාකාරිත්වය සහ මැලොන්ඩියල්ඩිහයිඩ් අන්තර්ගතය මත දෙහි 750 kg/h/m2 එකතු කිරීමේ බලපෑම ඔක්සලික් අම්ලය සමඟ ඉසීමේ බලපෑමට සමාන වේ. ප්‍රතිඵලවලින් පෙනී ගියේ ඔක්සලික් අම්ල ඉසින ප්‍රතිකාරය Panax notoginseng හි SOD සහ CAT වල ක්‍රියාකාරකම් වඩාත් ඵලදායී ලෙස වැඩි දියුණු කළ හැකි බවත් Panax notoginseng හි ආතති ප්‍රතිරෝධය වැඩි දියුණු කළ හැකි බවත්ය. 0.2 mol L-1 ඔක්සලික් අම්ලය සහ 3750 kg hm-2 දෙහි සමඟ ප්‍රතිකාර කිරීමෙන් SOD සහ POD වල ක්‍රියාකාරකම් අඩු කරන ලදී, එයින් පෙන්නුම් කරන්නේ ඔක්සලික් අම්ලය සහ Ca2+ අධික සාන්ද්‍රණයකින් ඉසීමෙන් ශාක ආතතිය ඇති විය හැකි බවයි, එය Luo සහ වෙනත් අයගේ අධ්‍යයනයට අනුකූල වේ. Wait 42.