Nature.com වෙත පිවිසීම ගැන ඔබට ස්තූතියි. ඔබ භාවිතා කරන බ්‍රව්සර් අනුවාදයේ CSS සඳහා සීමිත සහයක් ඇත. හොඳම අත්දැකීම සඳහා, ඔබ යාවත්කාලීන කළ බ්‍රව්සරයක් භාවිතා කරන ලෙස අපි නිර්දේශ කරමු (නැතහොත් Internet Explorer හි අනුකූලතා මාදිලිය අක්‍රිය කරන්න). මේ අතරතුර, අඛණ්ඩ සහාය සහතික කිරීම සඳහා, අපි විලාස සහ JavaScript නොමැතිව අඩවිය ප්‍රදර්ශනය කරන්නෙමු.
ඉහළ පැටවුම් අන්තර්ගතයක් සහිත ඉන්සියුලින් නැනෝ අංශු (NPs) විවිධ මාත්‍රා ආකාරවලින් විවිධ යෙදුම් සොයාගෙන ඇත. මෙම කාර්යයේ අරමුණ වන්නේ ක්‍රයෝප්‍රොටෙක්ටන්ට් එකක් ලෙස මැනිටෝල් සමඟ හෝ නැතිව ඉන්සියුලින් පටවන ලද කයිටෝසන් නැනෝ අංශුවල ව්‍යුහයට කැටි-වියළීමේ සහ ඉසින-වියළීමේ ක්‍රියාවලීන්ගේ බලපෑම ඇගයීමයි. අපි මෙම නැනෝ අංශු නැවත විසුරුවා හැරීමෙන් ඒවායේ ගුණාත්මකභාවය තක්සේරු කළෙමු. විජලනය වීමට පෙර, කයිටෝසන්/සෝඩියම් ට්‍රයිපොලිපොස්පේට්/ඉන්සියුලින් හරස්-සම්බන්ධිත නැනෝ අංශුවල අංශු ප්‍රමාණය 318 nm, PDI 0.18, කැප්සියුලකරණ කාර්යක්ෂමතාව 99.4% සහ පැටවීම 25.01% ලෙස ප්‍රශස්තිකරණය කරන ලදී. ප්‍රතිසංවිධානය කිරීමෙන් පසු, මැනිටෝල් භාවිතයෙන් තොරව කැටි-වියළීමේ ක්‍රමයක් මගින් නිපදවන ලද ඒවා හැර අනෙකුත් සියලුම නැනෝ අංශු ඒවායේ ගෝලාකාර අංශු ව්‍යුහය පවත්වා ගෙන ගියේය. ඉසින මගින් විජලනය කරන ලද මැනිටෝල් අඩංගු නැනෝ අංශු හා සසඳන විට, මැනිටෝල්-නිදහස් ඉසින-වියළන ලද නැනෝ අංශු කුඩාම මධ්‍යන්‍ය අංශු ප්‍රමාණය (376 nm) සහ සමාන කැප්සියුලකරණ අනුපාතයක් සහිත ඉහළම පැටවීමේ අන්තර්ගතය (25.02%) ද පෙන්නුම් කළේය. (98.7%) සහ PDI (0.20) වියළීම හෝ කැටි වියළීමේ ශිල්පීය ක්‍රම මගින් ලබා ගන්නා ලදී. මැනිටෝල් නොමැතිව ඉසින වියළීම මගින් වියළන ලද නැනෝ අංශු ඉන්සියුලින් වේගයෙන් මුදා හැරීමට සහ සෛලීය අවශෝෂණයේ ඉහළම කාර්යක්ෂමතාවයට ද හේතු විය. සාම්ප්‍රදායික කැටි වියළීමේ ක්‍රම හා සසඳන විට ක්‍රයෝප්‍රොටෙක්ටර් අවශ්‍යතාවයකින් තොරව ඉසින වියළීම ඉන්සියුලින් නැනෝ අංශු විජලනය කළ හැකි බවත්, වැඩි පැටවීමේ ධාරිතාවක්, අඩු ආකලන අවශ්‍යතා සහ මෙහෙයුම් පිරිවැය සැලකිය යුතු වාසියක් ඇති කරන බවත් මෙම අධ්‍යයනයෙන් පෙන්නුම් කෙරේ.
1922 දී එය සොයා ගැනීමෙන් පසු, ඉන්සියුලින් සහ එහි ඖෂධීය සූදානම 1 වර්ගයේ දියවැඩියාව (T1DM) සහ 2 වර්ගයේ දියවැඩියාව (T1DM) ඇති රෝගීන්ගේ ජීවිත බේරාගෙන ඇත. කෙසේ වෙතත්, ඉහළ අණුක බර ප්‍රෝටීනයක් ලෙස එහි ගුණාංග නිසා, ඉන්සියුලින් පහසුවෙන් එකතු වී, ප්‍රෝටියෝලයිටික් එන්සයිම මගින් බිඳ දමා, පළමු-පාස් ආචරණය මගින් ඉවත් කරනු ලැබේ. 1 වර්ගයේ දියවැඩියාව ඇති පුද්ගලයින්ට ඔවුන්ගේ ජීවිත කාලය පුරාම ඉන්සියුලින් එන්නත් අවශ්‍ය වේ. 2 වර්ගයේ දියවැඩියාව ඇති බව මුලින් හඳුනාගත් බොහෝ රෝගීන්ට දිගු කාලීන ඉන්සියුලින් එන්නත් ද අවශ්‍ය වේ. දිනපතා ඉන්සියුලින් එන්නත් කිරීම මෙම පුද්ගලයින්ට දිනපතා වේදනාව සහ අපහසුතාවයට බරපතල මූලාශ්‍රයක් වන අතර එය මානසික සෞඛ්‍යයට අහිතකර බලපෑම් ඇති කරයි. එහි ප්‍රතිඵලයක් වශයෙන්, මුඛ ඉන්සියුලින් පරිපාලනය වැනි අඩු අපහසුතාවයක් ඇති කරන ඉන්සියුලින් පරිපාලනයේ වෙනත් ආකාර පුළුල් ලෙස අධ්‍යයනය කෙරේ5 මන්ද ඒවා ලොව පුරා දියවැඩියාවෙන් පෙළෙන බිලියන 5 ක් පමණ වන ජනතාවගේ ජීවන තත්ත්වය යථා තත්ත්වයට පත් කිරීමේ හැකියාව ඇති බැවිනි.
මුඛ ඉන්සියුලින් ලබා ගැනීමේ උත්සාහයන්හි නැනෝ අංශු තාක්ෂණය සැලකිය යුතු දියුණුවක් ලබා දී ඇත4,6,7. නිශ්චිත ශරීර ස්ථාන වෙත ඉලක්කගත බෙදාහැරීම සඳහා ඉන්සියුලින් හායනයෙන් ඵලදායී ලෙස කැප්සියුලේට් කර ආරක්ෂා කරන එකක්. කෙසේ වෙතත්, නැනෝ අංශු සූත්‍ර භාවිතයට සීමාවන් කිහිපයක් ඇත, ප්‍රධාන වශයෙන් අංශු අත්හිටුවීම්වල ස්ථායිතා ගැටළු හේතුවෙන්. ගබඩා කිරීමේදී යම් එකතුවීමක් සිදුවිය හැකි අතර, එය ඉන්සියුලින්-පටවන ලද නැනෝ අංශුවල ජෛව උපයෝගීතාව අඩු කරයි8. ඊට අමතරව, ඉන්සියුලින් නැනෝ අංශුවල (NPs) ස්ථායිතාව සහතික කිරීම සඳහා නැනෝ අංශු සහ ඉන්සියුලින් වල පොලිමර් අනුකෘතියේ රසායනික ස්ථායිතාව ද සලකා බැලිය යුතුය. වර්තමානයේ, ගබඩා කිරීමේදී අනවශ්‍ය වෙනස්කම් වළක්වමින් ස්ථායී NPs නිර්මාණය කිරීම සඳහා කැටි-වියළන තාක්ෂණය රන් ප්‍රමිතියයි9.
කෙසේ වෙතත්, කැටි-වියළීම සඳහා අයිස් ස්ඵටිකවල යාන්ත්‍රික ආතතියෙන් NP වල ගෝලාකාර ව්‍යුහයට බලපෑම් කිරීම වැළැක්වීම සඳහා ක්‍රියෝප්‍රොටෙක්ටර් එකතු කිරීම අවශ්‍ය වේ. මෙය ලයොෆිලීකරණයෙන් පසු ඉන්සියුලින් නැනෝ අංශු පැටවීම සැලකිය යුතු ලෙස අඩු කරයි, මන්ද ක්‍රියෝප්‍රොටෙක්ටර් බර අනුපාතයෙන් වැඩි කොටසක් අල්ලා ගනී. එමනිසා, නිපදවන ලද ඉන්සියුලින් NP බොහෝ විට මුඛ පෙති සහ මුඛ පටල වැනි වියළි කුඩු සංයෝග නිෂ්පාදනය සඳහා නුසුදුසු බව සොයාගෙන ඇත, ඉන්සියුලින් චිකිත්සක කවුළුව සාක්ෂාත් කර ගැනීම සඳහා වියළි නැනෝ අංශු විශාල ප්‍රමාණයක් අවශ්‍ය වීම නිසා.
ඉසින වියළීම යනු ඖෂධ කර්මාන්තයේ ද්‍රව අවධි වලින් වියළි කුඩු නිෂ්පාදනය කිරීම සඳහා ප්‍රසිද්ධ හා මිල අඩු කාර්මික පරිමාණ ක්‍රියාවලියකි10,11. අංශු සෑදීමේ ක්‍රියාවලිය පාලනය කිරීම ජෛව ක්‍රියාකාරී සංයෝග කිහිපයක් නිසි ලෙස කැප්සියුලීකරණය කිරීමට ඉඩ සලසයි12, 13 . තවද, මුඛ පරිපාලනය සඳහා කැප්සියුලගත ප්‍රෝටීන සකස් කිරීම සඳහා එය ඵලදායී තාක්‍ෂණයක් බවට පත්ව ඇත.ඉසින වියළීමේදී, ජලය ඉතා ඉක්මනින් වාෂ්ප වී යන අතර එමඟින් අංශු හරයේ උෂ්ණත්වය අඩු මට්ටමක තබා ගැනීමට උපකාරී වේ11,14, එහි යෙදුමට තාප සංවේදී සංරචක කැප්සියුලීකරණය කිරීමට හැකි වේ.ඉසින වියළීමට පෙර, ආලේපන ද්‍රව්‍ය කැප්සියුලගත අමුද්‍රව්‍ය අඩංගු ද්‍රාවණය සමඟ හොඳින් සමජාතීය කළ යුතුය11,14.කැටි-වියළීම මෙන් නොව, ඉසින-වියළීමේදී කැප්සියුලීකරණයට පෙර සමජාතීයකරණය විජලනය අතරතුර කැප්සියුලකරණ කාර්යක්ෂමතාව වැඩි දියුණු කරයි.ඉසින-වියළීමේ කැප්සියුලකරණ ක්‍රියාවලියට ක්‍රයෝප්‍රොටෙක්ටර් අවශ්‍ය නොවන බැවින්, ඉහළ පැටවීමේ අන්තර්ගතයක් සහිත වියළි NP නිපදවීමට ඉසින-වියළීම භාවිතා කළ හැකිය.
මෙම අධ්‍යයනයෙන් අයන ජෙල් ක්‍රමයක් භාවිතා කරමින් කයිටෝසන් සහ සෝඩියම් ට්‍රයිපොලිපොස්පේට් හරස් සම්බන්ධ කිරීම මගින් ඉන්සියුලින්-පටවන ලද NP නිෂ්පාදනය වාර්තා කරයි. අයන ජෙලේෂන් යනු යම් යම් තත්වයන් යටතේ අයනික විශේෂ දෙකක් හෝ වැඩි ගණනක් අතර විද්‍යුත් ස්ථිතික අන්තර්ක්‍රියා හරහා නැනෝ අංශු නිපදවීමට ඉඩ සලසන සූදානම් කිරීමේ ක්‍රමයකි. ප්‍රශස්ත කරන ලද කයිටෝසන්/සෝඩියම් ට්‍රයිපොලිපොස්පේට්/ඉන්සියුලින් හරස් සම්බන්ධිත නැනෝ අංශු විජලනය කිරීම සඳහා කැටි-වියළීම සහ ඉසින-වියළීමේ ශිල්පීය ක්‍රම දෙකම භාවිතා කරන ලදී. විජලනය කිරීමෙන් පසු, ඒවායේ රූප විද්‍යාව SEM මගින් විශ්ලේෂණය කරන ලදී. ඒවායේ ප්‍රමාණයේ ව්‍යාප්තිය, මතුපිට ආරෝපණය, PDI, කැප්සියුලකරණ කාර්යක්ෂමතාව සහ පැටවීමේ අන්තර්ගතය මැනීම මගින් ඒවායේ නැවත ඒකාබද්ධ කිරීමේ හැකියාව ඇගයීමට ලක් කරන ලදී. විවිධ විජලනය කිරීමේ ක්‍රම මගින් නිපදවන ලද නැවත ද්‍රාව්‍ය කරන ලද නැනෝ අංශුවල ගුණාත්මකභාවය ද ඒවායේ ඉන්සියුලින් ආරක්ෂාව, මුදා හැරීමේ හැසිරීම සහ සෛලීය අවශෝෂණය කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාව සංසන්දනය කිරීමෙන් ඇගයීමට ලක් කරන ලදී.
මිශ්‍ර ද්‍රාවණයේ pH අගය සහ කයිටෝසන් සහ ඉන්සියුලින් අනුපාතය අවසාන NP වල අංශු ප්‍රමාණය සහ කැප්සියුලේෂන් කාර්යක්ෂමතාවයට (EE) බලපාන ප්‍රධාන සාධක දෙකකි, මන්ද ඒවා අයනොට්‍රොපික් ජෙලේෂන් ක්‍රියාවලියට සෘජුවම බලපායි. මිශ්‍ර ද්‍රාවණයේ pH අගය අංශු ප්‍රමාණය සහ කැප්සියුලේෂන් කාර්යක්ෂමතාව සමඟ බෙහෙවින් සහසම්බන්ධ වී ඇති බව පෙන්වා දෙන ලදී (රූපය 1a). රූපය 1a හි පෙන්වා ඇති පරිදි, pH අගය 4.0 සිට 6.0 දක්වා වැඩි වූ විට, සාමාන්‍ය අංශු ප්‍රමාණය (nm) අඩු වූ අතර EE සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි විය, pH අගය 6.5 දක්වා වැඩි වූ විට, සාමාන්‍ය අංශු ප්‍රමාණය වැඩි වීමට පටන් ගත් අතර EE නොවෙනස්ව පැවතුනි. කයිටෝසන් සහ ඉන්සියුලින් අනුපාතය වැඩි වන විට, සාමාන්‍ය අංශු ප්‍රමාණය ද වැඩි වේ. තවද, 2.5:1 (w/w) ට වඩා වැඩි කයිටෝසන්/ඉන්සියුලින් ස්කන්ධ අනුපාතයකින් නැනෝ අංශු සකස් කළ විට EE හි කිසිදු වෙනසක් දක්නට නොලැබුණි (රූපය 1b). එබැවින්, මෙම අධ්‍යයනයේ ප්‍රශස්ත සූදානම් කිරීමේ කොන්දේසි (pH 6.0, කයිටෝසන්/ඉන්සියුලින් ස්කන්ධ අනුපාතය 2.5:1) වැඩිදුර අධ්‍යයනය සඳහා ඉන්සියුලින්-පටවන ලද නැනෝ අංශු සකස් කිරීම සඳහා භාවිතා කරන ලදී. මෙම සූදානම් කිරීමේ තත්ත්වය යටතේ, ඉන්සියුලින් නැනෝ අංශුවල සාමාන්‍ය අංශු ප්‍රමාණය 318 nm (රූපය 1c), PDI 0.18, කාවැද්දීමේ කාර්යක්ෂමතාව 99.4%, සීටා විභවය 9.8 mv සහ ඉන්සියුලින් පැටවීම 25.01% (m/m) ලෙස ප්‍රශස්තිකරණය කරන ලදී. සම්ප්‍රේෂණ ඉලෙක්ට්‍රෝන අන්වීක්ෂ (TEM) ප්‍රතිඵල මත පදනම්ව, ප්‍රශස්තිකරණය කරන ලද නැනෝ අංශු දළ වශයෙන් ගෝලාකාර වූ අතර සාපේක්ෂව ඒකාකාර ප්‍රමාණයකින් විවික්ත විය (රූපය 1d).
ඉන්සියුලින් නැනෝ අංශුවල පරාමිති ප්‍රශස්තිකරණය: (අ) කයිටෝසන් සහ ඉන්සියුලින් 5:1 ස්කන්ධ අනුපාතයකින් සකස් කරන ලද ඉන්සියුලින් නැනෝ අංශුවල මධ්‍යන්‍ය විෂ්කම්භය සහ කැප්සියුලකරණ කාර්යක්ෂමතාව (EE) මත pH අගයෙහි බලපෑම; (ආ) කයිටෝසන් සහ ඉන්සියුලින් NP වල මධ්‍යන්‍ය විෂ්කම්භය සහ කැප්සියුලකරණ කාර්යක්ෂමතාව (EE) මත ඉන්සියුලින් ස්කන්ධ අනුපාතයේ බලපෑම (pH 6 හිදී සකස් කරන ලද); (ඇ) ප්‍රශස්තිකරණය කරන ලද ඉන්සියුලින් නැනෝ අංශුවල අංශු ප්‍රමාණය ව්‍යාප්තිය; (ඈ) ප්‍රශස්තිකරණය කරන ලද ඉන්සියුලින් NP වල TEM ක්ෂුද්‍ර සටහන.
කයිටෝසන් යනු 6.5 pKa අගයක් සහිත දුර්වල බහු විද්‍යුත් විච්ඡේදකයක් බව හොඳින් දන්නා කරුණකි. එහි ප්‍රධාන ඇමයිනෝ කාණ්ඩය හයිඩ්‍රජන් අයන මගින් ප්‍රෝටෝනීකරණය කර ඇති බැවින් එය ආම්ලික මාධ්‍ය තුළ ධන ලෙස ආරෝපණය වේ. එබැවින්, එය බොහෝ විට සෘණ ආරෝපිත සාර්ව අණු කැප්සියුලීකරණය කිරීමට වාහකයක් ලෙස භාවිතා කරයි. මෙම අධ්‍යයනයේ දී, කයිටෝසන් 5.3 ක සම විද්‍යුත් ලක්ෂ්‍යයක් සහිත ඉන්සියුලින් කැප්සියුලීකරණය කිරීමට භාවිතා කරන ලදී. කයිටෝසන් ආලේපන ද්‍රව්‍යයක් ලෙස භාවිතා කරන බැවින්, එහි අනුපාතය වැඩි වීමත් සමඟ, නැනෝ අංශුවල පිටත ස්ථරයේ ඝණකම අනුරූපව වැඩි වන අතර, එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස විශාල සාමාන්‍ය අංශු ප්‍රමාණය ලැබේ. ඊට අමතරව, කයිටෝසන් ඉහළ මට්ටම්වලට වැඩි ඉන්සියුලින් කැප්සියුලීකරණය කළ හැකිය. අපගේ නඩුවේදී, කයිටෝසන් සහ ඉන්සියුලින් අනුපාතය 2.5:1 දක්වා ළඟා වූ විට EE ඉහළම වූ අතර, අනුපාතය වැඩි වෙමින් පවතින විට EE හි සැලකිය යුතු වෙනසක් සිදු නොවීය.
කයිටෝසන් සහ ඉන්සියුලින් අනුපාතයට අමතරව, pH අගය NPs සකස් කිරීමේදී තීරණාත්මක කාර්යභාරයක් ඉටු කළේය.Gan et al. 17 කයිටෝසන් නැනෝ අංශුවල අංශු ප්‍රමාණයට pH අගයේ බලපෑම අධ්‍යයනය කළේය. pH අගය 6.0 දක්වා ළඟා වන තෙක් අංශු ප්‍රමාණයේ අඛණ්ඩ අඩුවීමක් ඔවුන් සොයා ගත් අතර, pH අගය > 6.0 දී අංශු ප්‍රමාණයේ සැලකිය යුතු වැඩි වීමක් නිරීක්ෂණය වූ අතර එය අපගේ නිරීක්ෂණවලට අනුකූල වේ. මෙම සංසිද්ධියට හේතුව pH අගය වැඩි වීමත් සමඟ ඉන්සියුලින් අණුව සෘණ මතුපිට ආරෝපණයක් ලබා ගන්නා අතර එමඟින් කයිටෝසන්/සෝඩියම් ට්‍රයිපොලිපොස්පේට් (TPP) සංකීර්ණය සමඟ විද්‍යුත් ස්ථිතික අන්තර්ක්‍රියා වලට අනුග්‍රහය දක්වන අතර එමඟින් කුඩා අංශු ප්‍රමාණය සහ ඉහළ EE ඇති වේ. කෙසේ වෙතත්, pH අගය 6.5 ට සකස් කළ විට, කයිටෝසන් මත ඇති ඇමයිනෝ කාණ්ඩ ප්‍රෝටෝනීකරණය වී ඇති අතර, එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස කයිටෝසන් නැමීම සිදු වේ. මේ අනුව, ඉහළ pH අගය TPP සහ ඉන්සියුලින් වලට ඇමයිනෝ අයන අඩුවෙන් නිරාවරණය වීමට හේතු වන අතර, එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස අඩු හරස් සම්බන්ධ කිරීම, විශාල අවසාන සාමාන්‍ය අංශු ප්‍රමාණය සහ අඩු EE ඇති වේ.
කැටි කළ වියළි සහ ඉසින වියළන ලද NP වල රූප විද්‍යාත්මක ගුණාංග විශ්ලේෂණය කිරීමෙන් වඩා හොඳ විජලනය සහ කුඩු සෑදීමේ ශිල්පීය ක්‍රම තෝරා ගැනීමට මඟ පෙන්විය හැකිය. කැමති ක්‍රමය ඖෂධ ස්ථායිතාව, ඒකාකාර අංශු හැඩය, ඉහළ ඖෂධ පැටවීම සහ මුල් ද්‍රාවණයේ හොඳ ද්‍රාව්‍යතාව ලබා දිය යුතුය. මෙම අධ්‍යයනයේ දී, ශිල්පීය ක්‍රම දෙක වඩා හොඳින් සංසන්දනය කිරීම සඳහා, විජලනය අතරතුර 1% මැනිටෝල් සහිත හෝ රහිත ඉන්සියුලින් NP භාවිතා කරන ලදී. කැටි කළ වියළීම සහ ඉසින වියළීම සඳහා විවිධ වියළි කුඩු සූත්‍රගත කිරීම්වල මැනිටෝල් තොග කාරකයක් හෝ ක්‍රියෝප්‍රොටෙක්ටන්ට් ලෙස භාවිතා කරයි. රූපය 2a හි පෙන්වා ඇති පරිදි, මැනිටෝල් නොමැතිව ලයොෆිලීකරණය කරන ලද ඉන්සියුලින් නැනෝ අංශු සඳහා, ස්කෑනිං ඉලෙක්ට්‍රෝන අන්වීක්ෂය (SEM) යටතේ විශාල, අක්‍රමවත් සහ රළු මතුපිටක් සහිත ඉතා සිදුරු සහිත කුඩු ව්‍යුහයක් නිරීක්ෂණය කරන ලදී. විජලනය කිරීමෙන් පසු කුඩු වල විවික්ත අංශු කිහිපයක් අනාවරණය විය (රූපය 2e). මෙම ප්‍රතිඵලවලින් පෙන්නුම් කළේ කිසිදු ක්‍රියෝප්‍රොටෙක්ටන්ට් නොමැතිව කැටි කළ වියළීමේදී බොහෝ NP දිරාපත් වූ බවයි. 1% මැනිටෝල් අඩංගු කැටි කළ සහ ඉසින ලද ඉන්සියුලින් නැනෝ අංශු සඳහා, සුමට මතුපිටක් සහිත ගෝලාකාර නැනෝ අංශු නිරීක්ෂණය කරන ලදී (රූපය. 2b,d,f,h).මැනිටෝල් නොමැතිව ඉසින ලද ඉන්සියුලින් නැනෝ අංශු ඉසින ලද නමුත් මතුපිට රැලි වැටී ඇත (රූපය 2c). ගෝලාකාර සහ රැලි සහිත මතුපිට පහත මුදා හැරීමේ හැසිරීම සහ සෛලීය අවශෝෂණය පරීක්ෂණ වලදී තවදුරටත් සාකච්ඡා කෙරේ.වියළන ලද NP වල දෘශ්‍යමාන පෙනුම මත පදනම්ව, මැනිටෝල් නොමැතිව ඉසින ලද වියළන ලද NPs සහ මැනිටෝල් සමඟ කැටි කර වියළන ලද සහ ඉසින ලද NPs දෙකම සියුම් NPs කුඩු ලබා දුන්නේය (රූපය 2f,g,h).අංශු මතුපිට අතර මතුපිට ප්‍රදේශය විශාල වන තරමට ද්‍රාව්‍යතාව වැඩි වන අතර එම නිසා මුදා හැරීමේ අනුපාතය වැඩි වේ.
විවිධ විජලනය වූ ඉන්සියුලින් NP වල රූප විද්‍යාව: (අ) මැනිටෝල් නොමැතිව ලයොෆිලීකරණය කරන ලද ඉන්සියුලින් NP වල SEM රූපය; (ආ) මැනිටෝල් සමඟ ලයොෆිලීකරණය කරන ලද ඉන්සියුලින් NP වල SEM රූපය; (ඇ) මැනිටෝල් නොමැතිව ඉසින ලද ඉන්සියුලින් NP වල SEM රූපය; (ඈ) මැනිටෝල් සමඟ ඉසින ලද ඉන්සියුලින් NP වල SEM රූපය; (ඉ) මැනිටෝල් නොමැතිව ලයොෆිලීකරණය කරන ලද ඉන්සියුලින් NPs කුඩු වල රූපය; (එෆ්) මැනිටෝල් සමඟ ලයොෆිලීකරණය කරන ලද ඉන්සියුලින් NPs රූපය; (උ) මැනිටෝල් නොමැතිව ඉසින ලද වියළන ලද ඉන්සියුලින් NPs කුඩු වල රූපය; (h) මැනිටෝල් සමඟ ඉසින ලද වියළන ලද ඉන්සියුලින් NPs කුඩු වල රූපය.
කැටි-වියළීමේදී, මැනිටෝල් ක්‍රයෝප්‍රොටෙක්ටන්ට් එකක් ලෙස ක්‍රියා කරයි, එන්පී අස්ඵටික ආකාරයෙන් තබා ගන්නා අතර අයිස් ස්ඵටික වලින් හානි වීම වළක්වයි19. ඊට වෙනස්ව, ඉසින වියළීමේදී කැටි කිරීමේ පියවරක් නොමැත. එබැවින් මෙම ක්‍රමයේදී මැනිටෝල් අවශ්‍ය නොවේ. ඇත්ත වශයෙන්ම, මැනිටෝල් නොමැතිව ඉසින-වියළන ලද එන්පී කලින් විස්තර කර ඇති පරිදි සියුම් එන්පී ලබා දුන්නේය. කෙසේ වෙතත්, මැනිටෝල් තවමත් ඉසින-වියළන ක්‍රියාවලියේදී පිරවුමක් ලෙස ක්‍රියා කළ හැකි අතර එමඟින් එන්පී වලට වඩාත් ගෝලාකාර ව්‍යුහයක් ලබා දිය හැකිය20 (රූපය 2d), එය එවැනි කැප්සියුලිත එන්පී වල ඒකාකාර මුදා හැරීමේ හැසිරීම ලබා ගැනීමට උපකාරී වේ. ඊට අමතරව, මැනිටෝල් අඩංගු කැටි-වියළන ලද සහ ඉසින-වියළන ලද ඉන්සියුලින් එන්පී දෙකෙහිම සමහර විශාල අංශු හඳුනාගත හැකි බව පැහැදිලිය (රූපය 2b,d), එය කැප්සියුලිත ඉන්සියුලින් සමඟ අංශු හරයේ මැනිටෝල් සමුච්චය වීම නිසා විය හැකිය. කයිටෝසන් ස්ථරයට. මෙම අධ්‍යයනයේ දී, විජලනය වීමෙන් පසු ගෝලාකාර ව්‍යුහය නොවෙනස්ව පවතින බව සහතික කිරීම සඳහා, මැනිටෝල් සහ කයිටෝසන් අනුපාතය 5:1 හි තබා ඇති බව සඳහන් කිරීම වටී, එවිට විශාල පිරවුමක් වියළි NP වල අංශු ප්‍රමාණය විශාල කළ හැකිය.
ෆූරියර් පරිවර්තන අධෝරක්ත දුර්වල කරන ලද සම්පූර්ණ පරාවර්තනය (FTIR-ATR) වර්ණාවලීක්ෂය මගින් නිදහස් ඉන්සියුලින්, කයිටෝසන්, කයිටෝසන්, TPP සහ ඉන්සියුලින් වල භෞතික මිශ්‍රණය සංලක්ෂිත විය. සියලුම විජලනය වූ NPs FTIR-ATR වර්ණාවලීක්ෂය භාවිතයෙන් සංලක්ෂිත විය. විශේෂයෙන්, 1641, 1543 සහ 1412 cm-1 කලාප තීව්‍රතාවයන් මැනිටෝල් සමඟ කැටි කළ-වියළන ලද NP වල සහ මැනිටෝල් සමඟ සහ නැතිව ඉසින-වියළන ලද NP වල නිරීක්ෂණය විය (රූපය 3). කලින් වාර්තා කළ පරිදි, ශක්තියේ මෙම වැඩිවීම් කයිටෝසන්, TPP සහ ඉන්සියුලින් අතර හරස් සම්බන්ධ කිරීම සමඟ සම්බන්ධ විය. කයිටෝසන් සහ ඉන්සියුලින් අතර අන්තර්ක්‍රියා විමර්ශනය කිරීමෙන් පෙන්නුම් කළේ ඉන්සියුලින්-පටවන ලද කයිටෝසන් නැනෝ අංශුවල FTIR වර්ණාවලියේ, කයිටෝසන් පටිය ඉන්සියුලින් සමඟ අතිච්ඡාදනය වී කාබොනයිල් තීව්‍රතාවය (1641 cm-1) සහ ඇමයින් (1543 cm-1) පටිය වැඩි කරන බවයි. TPP හි ට්‍රයිපොලිපොස්පේට් කාණ්ඩ ඇමෝනියම් කාණ්ඩවලට සම්බන්ධ වේ. කයිටෝසන් වල, 1412 cm-1 දී පටියක් සාදයි.
නිදහස් ඉන්සියුලින්, කයිටෝසන්, කයිටෝසන්/TPP/ඉන්සියුලින් වල භෞතික මිශ්‍රණ සහ විවිධ ක්‍රම මගින් විජලනය කරන ලද NP වල FTIR-ATR වර්ණාවලීක්ෂය.
තවද, මෙම ප්‍රතිඵල SEM හි පෙන්වා ඇති ප්‍රතිඵල සමඟ අනුකූල වන අතර, එයින් පෙන්නුම් කළේ කැප්සියුලගත NPs මැනිටෝල් සමඟ ඉසින විට සහ කැටි කළ විට නොවෙනස්ව පැවති බවයි, නමුත් මැනිටෝල් නොමැති විට, ඉසින වියළීමෙන් පමණක් කැටි කළ අංශු නිපදවුණි. ඊට වෙනස්ව, මැනිටෝල් නොමැතිව කැටි කළ NP වල FTIR-ATR වර්ණාවලි ප්‍රතිඵල කයිටෝසන්, TPP සහ ඉන්සියුලින් වල භෞතික මිශ්‍රණයට බෙහෙවින් සමාන විය. මෙම ප්‍රතිඵලයෙන් පෙන්නුම් කරන්නේ කයිටෝසන්, TPP සහ ඉන්සියුලින් අතර හරස් සම්බන්ධතා මැනිටෝල් නොමැතිව කැටි කළ NP වල තවදුරටත් නොපවතින බවයි. SEM ප්‍රතිඵලවල දැකිය හැකි ක්‍රයෝප්‍රොටෙක්ටන්ට් නොමැතිව කැටි කළ වියළීමේදී NPs ව්‍යුහය විනාශ විය (රූපය 2a). විජලනය වූ ඉන්සියුලින් NP වල රූප විද්‍යාව සහ FTIR ප්‍රතිඵල මත පදනම්ව, ප්‍රතිසංවිධාන අත්හදා බැලීම් සහ මැනිටෝල්-නිදහස් NP සඳහා ලයොෆිලීකරණය කරන ලද, ඉසින-වියළන ලද සහ මැනිටෝල්-නිදහස් NPs පමණක් භාවිතා කරන ලදී. විජලනය. සාකච්ඡා කරන්න.
විජලනය දිගු කාලීන ගබඩා කිරීම සහ වෙනත් සූත්‍රවලට නැවත සැකසීම සඳහා භාවිතා කරයි. ටැබ්ලට් සහ පටල වැනි විවිධ සූත්‍රවල භාවිතය සඳහා වියළි NP ගබඩා කිරීමෙන් පසු නැවත සකස් කිරීමේ හැකියාව ඉතා වැදගත් වේ. මැනිටෝල් නොමැති විට ඉසින-වියළන ලද ඉන්සියුලින් NP වල සාමාන්‍ය අංශු ප්‍රමාණය ප්‍රතිසංවිධානයෙන් පසුව පමණක් සුළු වශයෙන් වැඩි වූ බව අපි දුටුවෙමු. අනෙක් අතට, මැනිටෝල් සමඟ ඉසින-වියළන ලද සහ ශීත කළ-වියළන ලද ඉන්සියුලින් නැනෝ අංශුවල අංශු ප්‍රමාණය සැලකිය යුතු ලෙස වැඩි විය (වගුව 1). මෙම අධ්‍යයනයේ සියලුම NP නැවත ඒකාබද්ධ කිරීමෙන් පසු PDI සහ EE සැලකිය යුතු ලෙස වෙනස් නොවීය (p > 0.05). මෙම ප්‍රතිඵලයෙන් පෙන්නුම් කරන්නේ නැවත විසුරුවා හැරීමෙන් පසු බොහෝ අංශු නොවෙනස්ව පැවති බවයි. කෙසේ වෙතත්, මැනිටෝල් එකතු කිරීමෙන් ලයොෆිලීකරණය කරන ලද සහ ඉසින-වියළන ලද මැනිටෝල් නැනෝ අංශුවල ඉන්සියුලින් පැටවීම බෙහෙවින් අඩු විය (වගුව 1). ඊට වෙනස්ව, මැනිටෝල් නොමැතිව ඉසින-වියළන ලද NP වල ඉන්සියුලින් භාර අන්තර්ගතය පෙර මෙන් ම පැවතුනි (වගුව 1).
ඖෂධ බෙදා හැරීමේ අරමුණු සඳහා භාවිතා කරන විට නැනෝ අංශු පැටවීම ඉතා වැදගත් බව හොඳින් දන්නා කරුණකි. අඩු බරක් සහිත NP සඳහා, චිකිත්සක සීමාවට ළඟා වීමට ඉතා විශාල ද්‍රව්‍ය ප්‍රමාණයක් අවශ්‍ය වේ. කෙසේ වෙතත්, එවැනි ඉහළ NP සාන්ද්‍රණයන්හි ඉහළ දුස්ස්රාවිතතාවය පිළිවෙලින් මුඛ පරිපාලනය සහ එන්නත් කළ හැකි සූත්‍රගත කිරීමේදී අපහසුතාවයට හා දුෂ්කරතාවයට හේතු වේ 22. ඊට අමතරව, ඉන්සියුලින් NPs පෙති සහ දුස්ස්රාවී ජෛව පටල සෑදීමට ද භාවිතා කළ හැකිය23, 24, අඩු බර මට්ටම්වලදී NPs විශාල ප්‍රමාණයක් භාවිතා කිරීම අවශ්‍ය වන අතර, එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස මුඛ යෙදීම් සඳහා සුදුසු නොවන විශාල පෙති සහ ඝන ජෛව පටල ඇති වේ.එබැවින්, ඉහළ ඉන්සියුලින් බරක් සහිත විජලනය වූ NPs ඉතා යෝග්‍ය වේ.මැනිටෝල්-නිදහස් ඉසින-වියළන ලද NPs හි ඉහළ ඉන්සියුලින් බර මෙම විකල්ප බෙදා හැරීමේ ක්‍රම සඳහා ආකර්ෂණීය වාසි රැසක් ලබා දිය හැකි බව අපගේ ප්‍රතිඵලවලින් පෙනී යයි.
සියලුම විජලනය වූ NP මාස තුනක් ශීතකරණයේ තබා ඇත. SEM ප්‍රතිඵලවලින් පෙනී ගියේ සියලුම විජලනය වූ NP වල රූප විද්‍යාව මාස තුනක ගබඩා කාලය තුළ සැලකිය යුතු ලෙස වෙනස් නොවූ බවයි (රූපය 4). ජලයේ ප්‍රතිසංවිධානය කිරීමෙන් පසු, සියලුම NP වල EE හි සුළු අඩුවීමක් පෙන්නුම් කළ අතර මාස තුනක ගබඩා කාලය තුළ ඉන්සියුලින් කුඩා ප්‍රමාණයක් (~5%) පමණ නිකුත් කරන ලදී (වගුව 2). කෙසේ වෙතත්, සියලුම නැනෝ අංශු වල සාමාන්‍ය අංශු ප්‍රමාණය වැඩි විය. මැනිටෝල් නොමැතිව ඉසින-වියළන ලද NP වල අංශු ප්‍රමාණය 525 nm දක්වා වැඩි වූ අතර, මැනිටෝල් සමඟ ඉසින-වියළන ලද සහ ශීත කළ-වියළන ලද NP වල අංශු ප්‍රමාණය පිළිවෙලින් 872 සහ 921 nm දක්වා වැඩි විය (වගුව 2).
මාස තුනක් ගබඩා කර ඇති විවිධ විජලනය කළ ඉන්සියුලින් NP වල රූප විද්‍යාව: (අ) මැනිටෝල් සමඟ ලයොෆිලීකරණය කළ ඉන්සියුලින් NP වල SEM රූපය; (ආ) මැනිටෝල් නොමැතිව ඉසින-වියළන ලද ඉන්සියුලින් නැනෝ අංශු වල SEM රූපය; (ඇ) මැනිටෝල් නොමැතිව ඉසින-වියළන ලද ඉන්සියුලින් NP වල SEM රූප.
තවද, මැනිටෝල් සමඟ ඉසින ලද සහ ශීත කළ-වියළන ලද ප්‍රතිනිර්මාණය කරන ලද ඉන්සියුලින් නැනෝ අංශුවල අවක්ෂේප දක්නට ලැබුණි (රූපය S2). මෙය ජලයේ නිසි ලෙස අත්හිටුවන ලද විශාල අංශු නිසා ඇති විය හැක. ඉහත සියලු ප්‍රතිඵලවලින් පෙන්නුම් කරන්නේ ඉසින වියළීමේ තාක්ෂණයට ඉන්සියුලින් නැනෝ අංශු විජලනයෙන් ආරක්ෂා කළ හැකි බවත්, කිසිදු පිරවුම් හෝ ක්‍රියෝප්‍රොටෙක්ටර් නොමැතිව ඉන්සියුලින් නැනෝ අංශුවල ඉහළ බරක් ලබා ගත හැකි බවත්ය.
විජලනය වීමෙන් පසු එන්සයිම ජීර්ණයට එරෙහිව NP වල ආරක්ෂිත හැකියාව පෙන්නුම් කිරීම සඳහා pH = 2.5 මාධ්‍යයෙන් පෙප්සින්, ට්‍රිප්සින් සහ α-චයිමොට්‍රිප්සින් සමඟ ඉන්සියුලින් රඳවා තබා ගැනීම පරීක්ෂා කරන ලදී. විජලනය වූ NP වල ඉන්සියුලින් රඳවා තබා ගැනීම නැවුම්ව සකස් කරන ලද NP වල ඉන්සියුලින් රඳවා තබා ගැනීම සමඟ සංසන්දනය කරන ලද අතර, නිදහස් ඉන්සියුලින් සෘණ පාලනයක් ලෙස භාවිතා කරන ලදී. මෙම අධ්‍යයනයේ දී, නිදහස් ඉන්සියුලින් එන්සයිම ප්‍රතිකාර තුනෙහිම පැය 4 ක් ඇතුළත වේගවත් ඉන්සියුලින් ඉවත් කිරීමක් පෙන්නුම් කළේය (රූපය 5a-c). ඊට වෙනස්ව, මැනිටෝල් සමඟ ශීත කළ-වියළන ලද NP සහ මැනිටෝල් සමඟ හෝ නැතිව ඉසින-වියළන ලද NP වල ඉන්සියුලින් තුරන් කිරීමේ පරීක්ෂණය එන්සයිම ජීර්ණයට එරෙහිව මෙම NP වල සැලකිය යුතු ලෙස ඉහළ ආරක්ෂාවක් පෙන්නුම් කළ අතර එය නැවුම්ව සකස් කරන ලද ඉන්සියුලින් NP වලට සමාන විය (රූපය 1).5a-c).පෙප්සින්, ට්‍රිප්සින් සහ α-චයිමොට්‍රිප්සින් වල නැනෝ අංශු ආධාරයෙන්, ඉන්සියුලින් 50%, 60% සහ 75% කට වඩා පිළිවෙලින් පැය 4 ක් තුළ ආරක්ෂා කළ හැකිය (රූපය 5a-c).මෙය ඉන්සියුලින්-ආරක්ෂක හැකියාව රුධිරයට ඉන්සියුලින් අවශෝෂණය වැඩි කිරීමේ අවස්ථාව වැඩි කළ හැකිය25. මෙම ප්‍රතිඵලවලින් පෙනී යන්නේ මැනිටෝල් සමඟ හෝ නැතිව ඉසින වියළීම සහ මැනිටෝල් සමඟ කැටි කර වියළීම මගින් විජලනය වීමෙන් පසු එන්පී වල ඉන්සියුලින්-ආරක්ෂක හැකියාව ආරක්ෂා කර ගත හැකි බවයි.
විජලනය වූ ඉන්සියුලින් NP වල ආරක්ෂාව සහ මුදා හැරීමේ හැසිරීම: (අ) පෙප්සින් ද්‍රාවණයේ ඉන්සියුලින් ආරක්ෂා කිරීම; (ආ) ට්‍රිප්සින් ද්‍රාවණයේ ඉන්සියුලින් ආරක්ෂා කිරීම; (ඇ) α-කයිමොට්‍රිප්සින් ද්‍රාවණය මගින් ඉන්සියුලින් ආරක්ෂා කිරීම; (ඈ) pH = 2.5 ද්‍රාවණයක විජලනය වූ NP වල මුදා හැරීමේ හැසිරීම; (ඉ) pH = 6.6 ද්‍රාවණයක විජලනය වූ NP වල මුදා හැරීමේ හැසිරීම; (එෆ්) pH = 7.0 ද්‍රාවණයක විජලනය වූ NP වල මුදා හැරීමේ හැසිරීම.
ඉන්සියුලින් ප්‍රතිරෝධයට ඉන්සියුලින් වල බලපෑම පරීක්ෂා කිරීම සඳහා, නැවුම්ව සකස් කර නැවත සකස් කරන ලද වියළි ඉන්සියුලින් NP, ආමාශයේ, duodenum සහ ඉහළ කුඩා අන්ත්‍රයේ pH පරිසරය අනුකරණය කරමින්, විවිධ බෆර (pH = 2.5, 6.6, 7.0) තුළ 37 °C දී පුර්ව ලියාපදිංචි කරන ලදී. විවිධ පරිසරවල මුදා හැරීමේ හැසිරීම. ආමාශ ආන්ත්‍රික පත්රිකාවේ කොටස්. pH = 2.5 දී, ඉන්සියුලින්-පටවන ලද NPs සහ නැවත ද්‍රාව්‍ය කරන ලද වියළි ඉන්සියුලින් NPs පළමු පැය එක තුළ ආරම්භක පිපිරුම් මුදා හැරීමක් පෙන්නුම් කළ අතර, ඊළඟ පැය 5 තුළ මන්දගාමී මුදා හැරීමක් පෙන්නුම් කළේය (රූපය 5d). ආරම්භයේ දී මෙම වේගවත් මුදා හැරීම බොහෝ විට අංශුවේ අභ්‍යන්තර ව්‍යුහය තුළ සම්පූර්ණයෙන්ම නිශ්චල නොවන ප්‍රෝටීන් අණු වේගයෙන් මතුපිටින් අවශෝෂණය වීමේ ප්‍රතිඵලයක් විය හැකිය. pH = 6.5 දී, ඉන්සියුලින්-පටවන ලද NPs සහ නැවත සකස් කරන ලද වියළි ඉන්සියුලින් NPs පැය 6 ක් පුරා සුමට හා මන්දගාමී මුදා හැරීමක් පෙන්නුම් කළ අතර, පරීක්ෂණ ද්‍රාවණයේ pH අගය NPs-සකස් කළ ද්‍රාවණයට සමාන විය (රූපය 5e). pH = 7 දී, NPs අස්ථායී වූ අතර පළමු පැය දෙක තුළ සම්පූර්ණයෙන්ම පාහේ දිරාපත් විය (රූපය 5f). මෙයට හේතුව කයිටෝසන් ප්‍රෝටෝනීකරණය ඉහළ pH අගයකදී සිදුවන අතර එමඟින් අඩු සංයුක්ත පොලිමර් ජාලයක් සහ පටවන ලද ඉන්සියුලින් මුදා හැරීමක් සිදු වේ.
තවද, මැනිටෝල් නොමැතිව ඉසින ලද ඉන්සියුලින් NPs අනෙකුත් විජලනය වූ NPs වලට වඩා වේගවත් මුදා හැරීමේ පැතිකඩක් පෙන්නුම් කළේය (රූපය 5d-f). පෙර විස්තර කර ඇති පරිදි, මැනිටෝල් නොමැතිව වියළන ලද ප්‍රතිනිර්මාණය කරන ලද ඉන්සියුලින් NPs කුඩාම අංශු ප්‍රමාණය පෙන්නුම් කළේය. කුඩා අංශු විශාල මතුපිට ප්‍රදේශයක් සපයන බැවින්, අදාළ ඖෂධයෙන් වැඩි ප්‍රමාණයක් අංශු මතුපිට හෝ ඒ ආසන්නයේ ඇති අතර, එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස වේගවත් ඖෂධ මුදා හැරීමක් සිදු වේ26.
MTT විශ්ලේෂණය මගින් NP වල සයිටොටොක්සිසිටි බව විමර්ශනය කරන ලදී. රූපය S4 හි පෙන්වා ඇති පරිදි, සියලුම විජලනය වූ NPs 50-500 μg/ml සාන්ද්‍රණයකදී සෛල ශක්‍යතාවයට සැලකිය යුතු බලපෑමක් නොමැති බව සොයා ගන්නා ලදී, එයින් යෝජනා කරන්නේ සියලුම විජලනය වූ NPs චිකිත්සක කවුළුවට ළඟා වීමට ආරක්ෂිතව භාවිතා කළ හැකි බවයි.
ඉන්සියුලින් එහි භෞතික විද්‍යාත්මක ක්‍රියාකාරකම් ක්‍රියාත්මක කරන ප්‍රධාන ඉන්ද්‍රිය වන්නේ අක්මාවයි. HepG2 සෛල යනු in vitro හෙපටෝසයිට් උඩුගත කිරීමේ ආකෘතියක් ලෙස බහුලව භාවිතා වන මිනිස් හෙපටෝමා සෛල රේඛාවකි. මෙහිදී, කැටි-වියළීම සහ ඉසින-වියළීමේ ක්‍රම භාවිතයෙන් විජලනය වූ NP වල සෛලීය අවශෝෂණය තක්සේරු කිරීමට HepG2 සෛල භාවිතා කරන ලදී. 25 μg/mL සාන්ද්‍රණයකින් නොමිලේ FITC ඉන්සියුලින් සමඟ පුර්ව ලියාපදිංචි තක්සේරු කිරීමෙන් පැය කිහිපයක් ගත කිරීමෙන් පසු ප්‍රවාහ සයිටෝමෙට්‍රි සහ දර්ශනය භාවිතයෙන් කොන්ෆෝකල් ලේසර් ස්කෑන් කිරීම මගින් සෛලීය අවශෝෂණය, නැවුම්ව සකස් කරන ලද FITC ඉන්සියුලින්-පටවන ලද NPs සහ සමාන ඉන්සියුලින් සාන්ද්‍රණයකින් විජලනය කරන ලද FITC ඉන්සියුලින්-පටවන ලද NPs ප්‍රමාණාත්මක අන්වීක්ෂ (CLSM) නිරීක්ෂණ සිදු කරන ලදී. මැනිටෝල් නොමැතිව ලයොෆිලීකරණය කරන ලද NPs විජලනය අතරතුර විනාශ වූ අතර මෙම පරීක්ෂණයේදී ඇගයීමට ලක් නොවීය. නැවුම්ව සකස් කරන ලද ඉන්සියුලින්-පටවන ලද NPs, මැනිටෝල් සමඟ ලයොෆිලීකරණය කරන ලද NPs සහ මැනිටෝල් සහිත සහ රහිත ඉසින-වියළන ලද NPs (රූපය 6a) වල අන්තර් සෛලීය ප්‍රතිදීප්ත තීව්‍රතාවයන් 4.3, 2.6, 2.4, සහ නිදහස් ඒවාට වඩා 4.1 ගුණයකින් වැඩිය. පිළිවෙලින් FITC-ඉන්සියුලින් කාණ්ඩය (රූපය 6b). මෙම ප්‍රතිඵලවලින් පෙනී යන්නේ අධ්‍යයනයේ දී නිපදවන ලද ඉන්සියුලින්-පටවන ලද නැනෝ අංශුවල කුඩා ප්‍රමාණය හේතුවෙන්, ප්‍රධාන වශයෙන් නිදහස් ඉන්සියුලින් වලට වඩා සෛලීය අවශෝෂණයේදී සංවෘත ඉන්සියුලින් වඩාත් ප්‍රබල බවයි.
නැවුම්ව සකස් කරන ලද NP සහ විජලනය කළ NP සමඟ පැය 4 ක පුර්ව ලියාපදිංචි තක්සේරුවකින් පසු HepG2 සෛල අවශෝෂණය: (අ) HepG2 සෛල මගින් FITC-ඉන්සියුලින් අවශෝෂණය බෙදා හැරීම. (ආ) ප්‍රවාහ සයිටොමෙට්‍රි මගින් විශ්ලේෂණය කරන ලද ප්‍රතිදීප්ත තීව්‍රතාවයන්හි ජ්‍යාමිතික සාමාන්‍යය (n = 3), *P < 0.05 නිදහස් ඉන්සියුලින් සමඟ සසඳන විට.
ඒ හා සමානව, CLSM රූපවලින් පෙන්නුම් කළේ නැවුම්ව සකස් කරන ලද FITC-ඉන්සියුලින්-පටවන ලද NPs සහ FITC-ඉන්සියුලින්-පටවන ලද ඉසින-වියළන ලද NPs (මැනිටෝල් නොමැතිව) වල FITC ප්‍රතිදීප්ත තීව්‍රතාවයන් අනෙකුත් සාම්පලවලට වඩා බෙහෙවින් ශක්තිමත් බවයි (රූපය 6a). තවද, මැනිටෝල් එකතු කිරීමත් සමඟ, ද්‍රාවණයේ ඉහළ දුස්ස්රාවිතතාවය සෛලීය අවශෝෂණයට ප්‍රතිරෝධය වැඩි කළ අතර, එහි ප්‍රතිඵලයක් ලෙස ඉන්සියුලින් ප්‍රගුණනය අඩු විය. මෙම ප්‍රතිඵලවලින් පෙනී යන්නේ මැනිටෝල්-නිදහස් ඉසින-වියළන ලද NPs ඉහළම සෛලීය අවශෝෂණය කාර්යක්ෂමතාව පෙන්නුම් කළේ නැවත විසුරුවා හැරීමෙන් පසු ඒවායේ අංශු ප්‍රමාණය කැටි-වියළන ලද NPs වලට වඩා කුඩා වූ බැවිනි.
කයිටෝසන් (සාමාන්‍ය අණුක බර 100 KDa, 75–85% deacetylated) සිග්මා-ඇල්ඩ්‍රිච් වෙතින් මිලදී ගන්නා ලදී. (ඕක්විල්, ඔන්ටාරියෝ, කැනඩාව). සෝඩියම් ට්‍රයිපොලිපොස්පේට් (TPP) VWR (රැඩ්නෝර්, පෙන්සිල්වේනියා, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය) වෙතින් මිලදී ගන්නා ලදී. මෙම අධ්‍යයනයේදී භාවිතා කරන ලද නැවත සංයෝජක මිනිස් ඉන්සියුලින් ෆිෂර් සයන්ටිෆික් (වෝල්තම්, එම්ඒ, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය) වෙතින් ලබා ගන්නා ලදී. ෆ්ලෝරසීන් අයිසෝතියෝසයනේට් (FITC)-ලේබල් කරන ලද මිනිස් ඉන්සියුලින් සහ 4′,6-ඩයමිඩිනෝ-2-ෆීනයිලින්ඩෝල් ඩයිහයිඩ්‍රොක්ලෝරයිඩ් (DAPI) සිග්මා-ඇල්ඩ්‍රිච් වෙතින් මිලදී ගන්නා ලදී. (ඕක්විල්, ඔන්ටාරියෝ, කැනඩාව). HepG2 සෛල රේඛාව ATCC (මැනසාස්, වර්ජිනියා, ඇමරිකා එක්සත් ජනපදය) වෙතින් ලබා ගන්නා ලදී. අනෙකුත් සියලුම ප්‍රතික්‍රියාකාරක විශ්ලේෂණාත්මක හෝ වර්ණදේහ ශ්‍රේණිය විය.
0.1% ඇසිටික් අම්ලය අඩංගු ද්විත්ව ආසවනය කළ ජලයේ (DD ජලය) දියකර 1 mg/ml CS ද්‍රාවණයක් සකස් කරන්න. පිළිවෙලින් DD ජලයේ සහ 0.1% ඇසිටික් අම්ලයේ දියකර TPP සහ ඉන්සියුලින් 1 mg/ml ද්‍රාවණයක් සකස් කරන්න. පූර්ව-ඉමල්ෂන් පොලිට්‍රෝන PCU-2-110 අධිවේගී සමජාතීයකාරකයක් (Brinkmann Ind. Westbury, NY, USA) සමඟ සකස් කරන ලදී. සකස් කිරීමේ ක්‍රියාවලිය පහත පරිදි වේ: පළමුව, TPP ද්‍රාවණයෙන් 2ml ඉන්සියුලින් ද්‍රාවණය 4ml ට එකතු කර මිශ්‍රණය විනාඩි 30 ක් කලවම් කර සම්පූර්ණයෙන්ම මිශ්‍ර කරනු ලැබේ. ඉන්පසු, මිශ්‍ර ද්‍රාවණය සිරින්ජයක් හරහා අධිවේගී ඇවිස්සීම (10,000 rpm) යටතේ සිරින්ජයක් හරහා CS ද්‍රාවණයට බිංදු ආකාරයෙන් එකතු කරන ලදී. මිශ්‍රණ අයිස් ස්නානයක අධිවේගී ඇවිස්සීම (15,000 rpm) යටතේ විනාඩි 30 ක් තබා ඇති අතර, හරස් සම්බන්ධිත ඉන්සියුලින් NP ලබා ගැනීම සඳහා ඒවා නිශ්චිත pH අගයකට සකස් කරන ලදී. ඉන්සියුලින් NP වල අංශු ප්‍රමාණය තවදුරටත් සමජාතීය කිරීමට සහ අඩු කිරීමට, ඒවා ප්‍රොබ් වර්ගයේ සොනිකේටරයක් ​​(UP 200ST, Hielscher Ultrasonics, Teltow, Germany) භාවිතයෙන් අයිස් ස්නානයක අමතර මිනිත්තු 30ක් සොනිකේට් කරන ලදී.
ඉන්සියුලින් NPS, Z-සාමාන්‍ය විෂ්කම්භය, බහු විසර්ජන දර්ශකය (PDI) සහ සීටා විභවය සඳහා Litesizer 500 (Anton Paar, Graz, Austria) භාවිතා කර ගතික ආලෝක විසිරුම් (DLS) මිනුම් භාවිතා කරමින් 25°C දී DD ජලයේ තනුක කර පරීක්ෂා කරන ලදී. රූප විද්‍යාව සහ ප්‍රමාණයේ ව්‍යාප්තිය Hitachi H7600 සම්ප්‍රේෂණ ඉලෙක්ට්‍රෝන අන්වීක්ෂයක් (TEM) (Hitachi, Tokyo, Japan) මගින් සංලක්ෂිත වූ අතර, පසුව Hitachi රූපකරණ මෘදුකාංගය (Hitachi, Tokyo, Japan) භාවිතයෙන් රූප විශ්ලේෂණය කරන ලදී. ඉන්සියුලින් NP වල කැප්සියුලේෂන් කාර්යක්ෂමතාව (EE) සහ පැටවීමේ ධාරිතාව (LC) තක්සේරු කිරීම සඳහා, NPs 100 kDa අණුක බර කපා හැරීමක් සහිත අල්ට්‍රාෆිල්ටරේෂන් නල වලට පයිප්ප කර විනාඩි 30 ක් සඳහා 500 xg හිදී කේන්ද්‍රාපසාරී කරන ලදී. පෙරහනෙහි කැප්සියුල නොකළ ඉන්සියුලින් Agilent 1100 Series HPLC පද්ධතියක් (Agilent, Santa Clara, California, USA) භාවිතයෙන් ප්‍රමාණනය කරන ලදී. චතුර්ථක පොම්පය, ස්වයංක්‍රීය සාම්පලකය, තීරු තාපකය සහ DAD අනාවරකය. ඉන්සියුලින් C18 තීරුවක් (Zorbax, 3.5 μm, 4.6 mm × 150 mm, Agilent, USA) මගින් විශ්ලේෂණය කරන ලද අතර 214 nm හිදී අනාවරණය විය. ජංගම අවධිය ඇසිටොනයිට්‍රයිල් සහ ජලය වන අතර, 0.1% TFA අඩංගු වන අතර, 10/90 සිට 100/0 දක්වා අනුක්‍රමික අනුපාත ඇති අතර මිනිත්තු 10 ක් ධාවනය වේ. ජංගම අවධිය 1.0 ml/min ප්‍රවාහ අනුපාතයකින් පොම්ප කරන ලදී. තීරු උෂ්ණත්වය 20 °C ලෙස සකසා ඇත. සමීකරණ භාවිතා කරමින් EE සහ LC ප්‍රතිශත ගණනය කරන්න.(1) සහ Eq.(2).
ඉන්සියුලින් NP ප්‍රශස්ත කිරීම සඳහා 2.0 සිට 4.0 දක්වා විවිධ CS/ඉන්සියුලින් අනුපාත පරීක්ෂා කරන ලදී.සකස් කිරීමේදී විවිධ ප්‍රමාණයේ CS ද්‍රාවණ එකතු කරන ලද අතර ඉන්සියුලින්/TPP මිශ්‍රණය නියතව තබා ගන්නා ලදී.සියලුම ද්‍රාවණ (ඉන්සියුලින්, TPP සහ CS) එකතු කිරීමෙන් පසු මිශ්‍රණයේ pH අගය ප්‍රවේශමෙන් පාලනය කිරීමෙන් ඉන්සියුලින් NPs 4.0 සිට 6.5 දක්වා pH පරාසය තුළ සකස් කරන ලදී.ඉන්සියුලින් NPs සෑදීම ප්‍රශස්ත කිරීම සඳහා ඉන්සියුලින් නැනෝ අංශුවල EE සහ අංශු ප්‍රමාණය විවිධ pH අගයන් සහ CS/ඉන්සියුලින් ස්කන්ධ අනුපාතවලින් ඇගයීමට ලක් කරන ලදී.
ප්‍රශස්තිකරණය කරන ලද ඉන්සියුලින් NPs ඇලුමිනියම් බහාලුම මත තබා ටේප් එකකින් තද කළ පටක වලින් ආවරණය කරන ලදී. පසුව, ඉස්කුරුප්පු කරන ලද බහාලුම් තැටි වියළනයකින් සමන්විත Labconco FreeZone ශීතකරණ වියළනයක (Labconco, Kansas City, MO, USA) තැන්පත් කරන ලදී. වියළි ඉන්සියුලින් NPs ලබා ගැනීම සඳහා උෂ්ණත්වය සහ රික්ත පීඩනය -10 °C, පළමු පැය 2 සඳහා 0.350 Torr සහ ඉතිරි පැය 24 සඳහා 0 °C සහ 0.120 Torr ලෙස සකසා ඇත.
කැප්සියුලගත ඉන්සියුලින් ජනනය කිරීම සඳහා බුචි මිනි ස්ප්‍රේ ඩ්‍රයර් B-290 (BÜCHI, ෆ්ලාවිල්, ස්විට්සර්ලන්තය) භාවිතා කරන ලදී. තෝරාගත් වියළීමේ පරාමිතීන් වූයේ: උෂ්ණත්වය 100 °C, පෝෂක ප්‍රවාහය 3 L/min, සහ වායු ප්‍රවාහය 4 L/min.
විජලනයට පෙර සහ පසු ඉන්සියුලින් NPs FTIR-ATR වර්ණාවලීක්ෂය භාවිතයෙන් සංලක්ෂිත කරන ලදී. විජලනය වූ නැනෝ අංශු මෙන්ම නිදහස් ඉන්සියුලින් සහ කයිටෝසන් විශ්වීය ATR සාම්පල උපාංගයකින් (PerkinElmer, Waltham, Massachusetts, USA) සමන්විත Spectrum 100 FTIR වර්ණාවලීක්ෂ ඡායාරූපමානයක් (PerkinElmer, Waltham, Massachusetts, USA) භාවිතයෙන් විශ්ලේෂණය කරන ලදී. 4000-600 cm2 සංඛ්‍යාත පරාසය තුළ 4 cm2 විභේදනයකින් ස්කෑන් 16 කින් සංඥා සාමාන්‍ය ලබා ගන්නා ලදී.
වියළි ඉන්සියුලින් NP වල රූප විද්‍යාව, Helios NanoLab 650 නාභිගත අයන කදම්භ පරිලෝකන ඉලෙක්ට්‍රෝන අන්වීක්ෂය (FIB-SEM) (FEI, Hillsboro, Oregon, USA) මගින් ග්‍රහණය කරගත් ශීත කළ සහ ඉසින ලද ඉන්සියුලින් NP වල SEM රූප මගින් තක්සේරු කරන ලදී. භාවිතා කරන ලද ප්‍රධාන පරාමිතිය වූයේ වෝල්ටීයතාවය 5 keV සහ ධාරාව 30 mA ය.
සියලුම විජලනය වූ ඉන්සියුලින් NPs dd ජලයේ නැවත විසුරුවා හරින ලදී. විජලනය වූ පසු ඒවායේ ගුණාත්මකභාවය තක්සේරු කිරීම සඳහා කලින් සඳහන් කළ ක්‍රමයම භාවිතා කරමින් අංශු ප්‍රමාණය, PDI, EE සහ LC නැවත පරීක්ෂා කරන ලදී. දිගු කාලීන ගබඩා කිරීමෙන් පසු NP වල ගුණාංග පරීක්ෂා කිරීමෙන් ඇන්හයිඩ්‍රොඉන්සියුලින් NP වල ස්ථායිතාව ද මනිනු ලැබීය. මෙම අධ්‍යයනයේ දී, විජලනය වූ පසු සියලුම NPs මාස තුනක් ශීතකරණයක් තුළ ගබඩා කරන ලදී. මාස තුනක ගබඩා කිරීමෙන් පසු, NPs රූප විද්‍යාත්මක අංශු ප්‍රමාණය, PDI, EE සහ LC සඳහා පරීක්ෂා කරන ලදී.
විජලනය වීමෙන් පසු ඉන්සියුලින් ආරක්ෂා කිරීමේදී ඉන්සියුලින් වල කාර්යක්ෂමතාව තක්සේරු කිරීම සඳහා ප්‍රතිනිර්මාණය කරන ලද NPs මිලි ලීටර් 5 ක්, අනුකරණය කරන ලද ආමාශයික තරලය (pH 1.2, 1% පෙප්සින් අඩංගු), බඩවැල් තරලය (pH 6.8, 1% ට්‍රිප්සින් අඩංගු) හෝ චයිමොට්‍රිප්සින් ද්‍රාවණය (100 g/mL, පොස්පේට් බෆරයේ, pH 7.8) අඩංගු මිලි ලීටර් 45 ක දියකරන්න. ඒවා 37°C දී 100 rpm කැළඹීමේ වේගයකින් පුර්ව ලියාපදිංචි කරන ලදී. ද්‍රාවණයෙන් 500 μL විවිධ කාල ලක්ෂ්‍යවලදී එකතු කරන ලද අතර ඉන්සියුලින් සාන්ද්‍රණය HPLC මගින් තීරණය කරන ලදී.
නැවුම්ව සකස් කරන ලද සහ විජලනය කරන ලද ඉන්සියුලින් NP වල in vitro මුදා හැරීමේ හැසිරීම ඩයලිසිස් බෑග් ක්‍රමය (අණුක බර කපා හැරීම 100 kDa, Spectra Por Inc.) මගින් පරීක්ෂා කරන ලදී. නැවුම්ව සකස් කරන ලද සහ ප්‍රතිනිර්මාණය කරන ලද වියළි NPs ආමාශයේ, duodenum හි සහ ඉහළ කුඩා අන්ත්‍රයේ pH පරිසරය අනුකරණය කිරීම සඳහා pH 2.5, pH 6.6 සහ pH 7.0 (0.1 M පොස්පේට්-බෆර් කරන ලද සේලයින්, PBS) හි තරලවල ඩයලයිස් කරන ලදී. සියලුම සාම්පල 200 rpm හි අඛණ්ඩ සෙලවීම සමඟ 37 °C දී පුර්ව ලියාපදිංචි කරන ලදී. පහත සඳහන් වේලාවන්හිදී 5 mL ඩයලිසිස් බෑගයෙන් පිටත තරලය ආශ්වාස කරන්න: 0.5, 1, 2, 3, 4 සහ 6 පැය, සහ වහාම නැවුම් ඩයලිසේට් සමඟ පරිමාව නැවත පුරවන්න. තරලයේ ඇති ඉන්සියුලින් දූෂණය HPLC මගින් විශ්ලේෂණය කරන ලද අතර, නැනෝ අංශු වලින් ඉන්සියුලින් මුදා හැරීමේ අනුපාතය නැනෝ අංශුවල කැප්සියුලේට් කර ඇති සම්පූර්ණ ඉන්සියුලින් වලට මුදා හරින ලද නිදහස් ඉන්සියුලින් අනුපාතයෙන් ගණනය කරන ලදී (සමීකරණය 3).
මානව හෙපටෝසෙලියුලර් පිළිකා සෛල රේඛාව HepG2 සෛල 10% භ්‍රෑණ ගව සෙරුමය, 100 IU/mL පෙනිසිලින් සහ 100 μg/mL ස්ට්‍රෙප්ටොමයිසින් අඩංගු Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) භාවිතයෙන් 60 mm විෂ්කම්භයක් සහිත භාජනවල වගා කරන ලදී. සංස්කෘතීන් 37°C, 95% සාපේක්ෂ ආර්ද්‍රතාවය සහ 5% CO2 හි පවත්වා ගෙන යන ලදී. අවශෝෂණය කිරීමේ පරීක්ෂණ සඳහා, HepG2 සෛල 1 × 105 සෛල/මිලි ලීටර් 8 ළිං Nunc Lab-Tek කුටීර ස්ලයිඩ් පද්ධතියකට (Thermo Fisher, NY, USA) බීජ කරන ලදී. සයිටොටොක්සිසිටි පරීක්ෂණ සඳහා, ඒවා 5 × 104 සෛල/මිලි ලීටර් ඝනත්වයකින් 96 ළිං තහඩු (කෝනිං, NY, USA) තුළට බීජ කරන ලදී.
නැවුම් ලෙස සකස් කරන ලද සහ විජලනය කරන ලද ඉන්සියුලින් NPs වල සයිටොටොක්සිසිටි බව තක්සේරු කිරීම සඳහා MTT තක්සේරුව භාවිතා කරන ලදී30. HepG2 සෛල 96-ළිං තහඩු වල සෛල 5 × 104/mL ඝනත්වයකින් බීජ කර පරීක්ෂාවට පෙර දින 7 ක් වගා කරන ලදී. ඉන්සියුලින් NPs සංස්කෘතික මාධ්‍යයේ විවිධ සාන්ද්‍රණයන්ට (50 සිට 500 μg/mL) තනුක කර පසුව සෛල වලට පරිපාලනය කරන ලදී. පැය 24 ක පුර්ව ලියාපදිංචි තක්සේරුවකින් පසු, සෛල PBS සමඟ 3 වතාවක් සෝදා 0.5 mg/ml MTT අඩංගු මාධ්‍යයකින් අමතර පැය 4 ක් පුර්ව ලියාපදිංචි කරන ලදී. Tecan අනන්ත M200 pro වර්ණාවලීක්ෂ ඡායාරූපමාන තහඩු කියවනය (Tecan, Männedorf, ස්විට්සර්ලන්තය) භාවිතයෙන් 570 nm දී කහ ටෙට්‍රාසෝලියම් MTT සිට දම් පැහැති ෆෝමැසාන් දක්වා එන්සයිම අඩු කිරීම මැනීමෙන් සයිටොටොක්සිසිටි බව තක්සේරු කරන ලදී.
NP වල සෛලීය අවශෝෂණය කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාව confocal ලේසර් ස්කෑනිං අන්වීක්ෂය සහ ප්‍රවාහ සයිටොමෙට්‍රි විශ්ලේෂණය මගින් පරීක්ෂා කරන ලදී. Nunc Lab-Tek කුටීර ස්ලයිඩ් පද්ධතියේ සෑම ළිඳක්ම නොමිලේ FITC-ඉන්සියුලින්, FITC-ඉන්සියුලින්-පටවන ලද NPs සමඟ ප්‍රතිකාර කරන ලද අතර, එම සාන්ද්‍රණයේදී විජලනය වූ FITC-ඉන්සියුලින් NPs 25 μg/mL නැවත සකස් කර පැය 4 ක් පුර්ව ලියාපදිංචි කරන ලදී. සෛල PBS සමඟ 3 වතාවක් සෝදා 4% පැරෆෝමල්ඩිහයිඩ් සමඟ සවි කරන ලදී. න්‍යෂ්ටීන් 4′,6-ඩයමිඩිනෝ-2-ෆීනයිලින්ඩෝල් (DAPI) සමඟ පැල්ලම් කරන ලදී. Olympus FV1000 ලේසර් ස්කෑනිං/ද්වි-ෆෝටෝන කොන්ෆෝකල් අන්වීක්ෂයක් (ඔලිම්පස්, ෂින්ජුකු නගරය, ටෝකියෝ, ජපානය) භාවිතයෙන් ඉන්සියුලින් ප්‍රාදේශීයකරණය නිරීක්ෂණය කරන ලදී. ප්‍රවාහ සයිටොමෙට්‍රි විශ්ලේෂණය සඳහා, 10 μg/mL නොමිලේ FITC-ඉන්සියුලින්, FITC-ඉන්සියුලින්-පටවන ලද NPs සහ නැවත ද්‍රාව්‍ය කරන ලද විජලනය වූ FITC-ඉන්සියුලින් NPs වල එකම සාන්ද්‍රණයන් විය. HepG2 සෛල සමඟ බීජ කරන ලද ළිං 96 තහඩු වලට එකතු කර පැය 4 ක් ඉන්කියුබේට් කරන ලදී. ඉන්කියුබේෂන් පැය 4 කට පසු, සෛල ඉවත් කර FBS සමඟ 3 වතාවක් සෝදා හරින ලදී. නියැදියකට සෛල 5 × 104 BD LSR II ප්‍රවාහ සයිටෝමීටරයක් ​​(BD, ෆ්‍රෑන්ක්ලින් විල්, නිව් ජර්සි, එක්සත් ජනපදය) මගින් විශ්ලේෂණය කරන ලදී.
සියලුම අගයන් මධ්‍යන්‍ය ± සම්මත අපගමනය ලෙස ප්‍රකාශ වේ. සියලුම කණ්ඩායම් අතර සංසන්දනයන් IBM SPSS සංඛ්‍යාලේඛන 26 මගින් Mac සඳහා (IBM, Endicott, New York, USA) ඒකපාර්ශ්වික ANOVA හෝ t-පරීක්ෂණය භාවිතයෙන් තක්සේරු කරන ලද අතර p < 0.05 සංඛ්‍යානමය වශයෙන් වැදගත් ලෙස සැලකේ.
මෙම අධ්‍යයනයෙන් පෙන්නුම් කරන්නේ සම්මත කැටි-වියළන ක්‍රමවලට සාපේක්ෂව බල්කින් කාරක හෝ ක්‍රියෝප්‍රොටෙක්ටර් ධාරිතාව සහ ඉහළ බර ධාරිතාවක් භාවිතා කරමින් වඩා හොඳ ප්‍රතිසංවිධානයක් සහිත හරස්-සම්බන්ධිත කයිටෝසන්/ටීපීපී/ඉන්සියුලින් නැනෝ අංශු විජලනය කිරීමට ඉසින වියළීමේ නම්‍යශීලීභාවය සහ හැකියාවයි. ප්‍රශස්තිකරණය කරන ලද ඉන්සියුලින් නැනෝ අංශු සාමාන්‍ය අංශු ප්‍රමාණය 318 nm සහ කැප්සියුලකරණ කාර්යක්ෂමතාව 99.4%ක් ලබා දුන්නේය. විජලනය කිරීමෙන් පසු SEM සහ FTIR ප්‍රතිඵලවලින් පෙන්නුම් කළේ ගෝලාකාර ව්‍යුහය මැනිටෝල් සමඟ සහ නැතිව ඉසින-වියළන ලද NP වල පමණක් පවත්වා ගෙන ගොස් ඇති බවත් මැනිටෝල් සමඟ ලයොෆිලීකරණය කර ඇති බවත්, නමුත් මැනිටෝල් නොමැතිව ලයොෆිලීකරණය කරන ලද NP විජලනය අතරතුර දිරාපත් වූ බවත්ය. ප්‍රතිසංවිධාන හැකියාවන් පරීක්ෂණයේදී, මැනිටෝල් නොමැතිව ඉසින-වියළන ලද ඉන්සියුලින් නැනෝ අංශු කුඩාම මධ්‍යන්‍ය අංශු ප්‍රමාණය සහ ප්‍රතිසංවිධානය මත ඉහළම පැටවීම පෙන්නුම් කළේය. මෙම සියලුම විජලනය කරන ලද NP වල මුදා හැරීමේ හැසිරීම් වලින් පෙන්නුම් කළේ ඒවා pH = 2.5 සහ pH = 7 ද්‍රාවණවලින් වේගයෙන් මුදා හරින බවත්, pH = 6.5 ද්‍රාවණයේදී ඉතා ස්ථායී බවත්ය. අනෙකුත් නැවත විසුරුවා හරින ලද විජලනය කරන ලද NPs හා සසඳන විට, NPs මැනිටෝල් නොමැතිව ඉසින-වියළන ලද ඒවා වේගවත්ම මුදා හැරීම පෙන්නුම් කළේය. මෙම ප්‍රතිඵලය සෛලීය අවශෝෂණය පිළිබඳ විශ්ලේෂණයේදී නිරීක්ෂණය කළ ප්‍රතිඵලයට අනුකූල වේ, මන්ද මැනිටෝල් නොමැති විට ඉසින-වියළන ලද NPs නැවුම්ව සකස් කරන ලද NPs වල සෛලීය අවශෝෂණය කාර්යක්ෂමතාව සම්පූර්ණයෙන්ම පාහේ පවත්වා ගෙන යන බැවිනි. මෙම ප්‍රතිඵලවලින් පෙනී යන්නේ මැනිටෝල්-නිදහස් ඉසින වියළීම මගින් සකස් කරන ලද වියළි ඉන්සියුලින් නැනෝ අංශු මුඛ පෙති හෝ ජෛව ඇලවුම් පටල වැනි අනෙකුත් නිර්ජලීය මාත්‍රා ආකාරවලට තවදුරටත් සැකසීම සඳහා වඩාත් සුදුසු බවයි.
බුද්ධිමය දේපළ ගැටළු හේතුවෙන්, වත්මන් අධ්‍යයනයේදී ජනනය කරන ලද සහ/හෝ විශ්ලේෂණය කරන ලද දත්ත කට්ටල ප්‍රසිද්ධියේ ලබා ගත නොහැකි නමුත් සාධාරණ ඉල්ලීමක් මත අදාළ කතුවරුන්ගෙන් ලබා ගත හැකිය.
කගන්, ඒ. දෙවන වර්ගයේ දියවැඩියාව: සමාජීය හා විද්‍යාත්මක සම්භවය, වෛද්‍ය සංකූලතා සහ රෝගීන්ට සහ අනෙකුත් අයට ඇඟවුම්. (මැක්ෆාර්ලේන්, 2009).
සිං, ඒපී, ගුඕ, වයි., සිං, ඒ., ෂී, ඩබ්ලිව්. සහ ජියැං, පී. ඉන්සියුලින් කැප්සියුලේෂන් සංවර්ධනය: මුඛ පරිපාලනය දැන් කළ හැකිද?ජේ. ෆාමසි.බයෝ-ෆාමසි.රසර්වෝයර්.1, 74–92 (2019).
වොන්ග්, සීවයි, අල්-සලාමි, එච්. සහ ඩාස්, සීආර් දියවැඩියාවට ප්‍රතිකාර කිරීම සඳහා මුඛ ඉන්සියුලින්-පටවන ලද ලිපොසෝම බෙදා හැරීමේ පද්ධතිවල මෑත කාලීන දියුණුව. අර්ථ නිරූපණය. ජේ. ෆාමසිය.549, 201–217 (2018).